BSA在PCR体系中的作用?
大家知道,一定浓度的BSA在PCR体系中有助于Tag酶的稳定性及活性,从而提高PCR的效率我今天查了一下很多公司的产品,我想问问大家牛血清白蛋白组分V是什么意思啊?好像很多公司都买这个BSAV,
与BSA有什么区别呢?我前面在PCR体系中加过BSA,但是好像没有明显的效果,是原来师姐订的,听说很便宜的,我想可能纯度不够,所以没能起到作用的原因。今天查,才发现还有一个牛血清白蛋白组分V,不明白,所以来问问大家!
先谢谢大家 BSAV就是bsa组分5,纯度要比单纯的BSA高很多
因此做精密试验最好用这个
好像也不是很贵
因为我上次一不小心把普通BSA订成BSAV了 谢谢你的回复,在PCR体系中能起作用的BSA的纯度需要大于99%的,不同公司不同纯度的BSA价格差异是很大的,那么还有一个问题就是,BSA第五组份是否完全可以替代BSA呢?是不是由于技术的改进,大家都用BSAV替代原来的BSA了。比如:invitrogen的150毫克就要2134人民币呢?罗市的10克1962元,价格差异好大的,主要是纯度的问题。 有谁能举例介绍一个使用BSA的PCR体系?
我想知道各成分的用量。 在你可以正常PCR的体系中,另外再加入BSA,可以试一下不同的BSA浓度对PCR扩增效果的影响,比如加入BSA终浓度为6μg/μl 、4μg/μl 、3μg/μl 、2μg/μl 、1μg/μl 、016μg/μl 、0125μg/μl 和0μg/μ,找到一个合适的BSA浓度即可,BSA的纯度要尽量的选择比较高的,这样会更有效。
我们老师以前的试验中表明在加BSA的PCR效果明显比没有加的好,所以一般都会加一点的
以前的人做试验时很多试剂都是自己配的,不知道你用的什么体系,一般公司与酶附在一起的10*Buffer都是标准体系 10×扩增缓冲液 10ul
4种dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2 1.5mmol/L
加双或三蒸水至 100ul
其实里面很多都是可以调节的,我的经验告诉我,一般正常体系,如果模版和引物好用的话,那么就问题不大了 学习了lliaxue'xi
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