鸭绿江学术资源论坛's Archiver

快乐小妖 发表于 2006-11-2 17:35

BSA在PCR体系中的作用?

  大家知道,一定浓度的BSA在PCR体系中有助于Tag酶的稳定性及活性,从而提高PCR的效率
我今天查了一下很多公司的产品,我想问问大家牛血清白蛋白组分V是什么意思啊?好像很多公司都买这个BSAV,
与BSA有什么区别呢?我前面在PCR体系中加过BSA,但是好像没有明显的效果,是原来师姐订的,听说很便宜的,我想可能纯度不够,所以没能起到作用的原因。今天查,才发现还有一个牛血清白蛋白组分V,不明白,所以来问问大家!
先谢谢大家

love_bobo 发表于 2006-11-2 17:59

BSAV就是bsa组分5,纯度要比单纯的BSA高很多
因此做精密试验最好用这个
好像也不是很贵
因为我上次一不小心把普通BSA订成BSAV了

快乐小妖 发表于 2006-11-2 19:41

谢谢你的回复,在PCR体系中能起作用的BSA的纯度需要大于99%的,不同公司不同纯度的BSA价格差异是很大的,那么还有一个问题就是,BSA第五组份是否完全可以替代BSA呢?是不是由于技术的改进,大家都用BSAV替代原来的BSA了。比如:invitrogen的150毫克就要2134人民币呢?罗市的10克1962元,价格差异好大的,主要是纯度的问题。

给你送威望 发表于 2006-11-3 00:51

有谁能举例介绍一个使用BSA的PCR体系?
我想知道各成分的用量。

快乐小妖 发表于 2006-11-3 10:30

在你可以正常PCR的体系中,另外再加入BSA,可以试一下不同的BSA浓度对PCR扩增效果的影响,比如加入BSA终浓度为6μg/μl 、4μg/μl 、3μg/μl 、2μg/μl 、1μg/μl 、016μg/μl 、0125μg/μl 和0μg/μ,找到一个合适的BSA浓度即可,BSA的纯度要尽量的选择比较高的,这样会更有效。
我们老师以前的试验中表明在加BSA的PCR效果明显比没有加的好,所以一般都会加一点的
以前的人做试验时很多试剂都是自己配的,不知道你用的什么体系,一般公司与酶附在一起的10*Buffer都是标准体系   10×扩增缓冲液   10ul
   4种dNTP混合物   各200umol/L
   引物        各10~100pmol 
   模板DNA       0.1~2ug 
    Taq DNA聚合酶   2.5u 
   Mg2        1.5mmol/L
   加双或三蒸水至   100ul
其实里面很多都是可以调节的,我的经验告诉我,一般正常体系,如果模版和引物好用的话,那么就问题不大了

fangfeng 发表于 2007-11-30 21:49

学习了lliaxue'xi

页: [1]

Powered by Discuz! Archiver 6.1.0  © 2001-2007 Comsenz Inc.