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xhlbudd 发表于 2006-12-3 19:19

[专家坐堂]本期专家:蛇皮膏药(专长:心血管药理,欢迎大家提问!)

[color=blue][size=4]专业版块的运作,离不开专业高手的支持,为了提高药理毒理讨论区的讨论水平,更好地解决会员的疑难,我们准备举办几期专家坐堂栏目,回答会员的问题,药理版我们请蛇皮膏药斑竹来开个头。蛇皮膏药目前就读于某大学知名心血管药理学课题组,在这方面有比较丰富的经验,希望这次活动能给药理版的朋友带来帮助,大家有问题可以直接回帖提出,不必另发主题贴。
专家介绍
论坛ID:蛇皮膏药
专长:心血管药理[/size][/color]
[size=4][color=blue]若在提问中,需要图片者,可参考
[url]http://forum.e2002.com/read.php?tid=115756[/url]
中的方法[/color][/size]
[size=4][color=chocolate][b]另外,请大家不要在此帖中讨论药理学专业以外的其他问题,这样可以保持该帖的整洁,便于其他站友查看和学习,敬请配合!(如有其他事务欲交流,可以通过论坛短信的方式)[/b] [/color][/size]

蛇皮膏药 发表于 2006-12-3 21:54

大家有什么可以提哈:)  共同学习! 共同提高

emxz 发表于 2006-12-4 14:09

请问一种新药的研究:
如果已经做了毒理学,
是不是就不用再做代谢了(也就是想问药物代谢和毒理在药物研究中有没有差别)
因为现在偶要做药代,不知道要不要再做代谢,
偶理解是只做动力学就可以了
呵呵,不知道怎么表述,有点乱
因为偶对这方面确实很不熟
望解答....................

wenxian? 发表于 2006-12-4 15:46

[quote][b]引用第2楼[i]emxz[/i]于[i]2006-12-04 14:09[/i]发表的[/b]:
请问一种新药的研究:
如果已经做了毒理学,
是不是就不用再做代谢了(也就是想问药物代谢和毒理在药物研究中有没有差别)
因为现在偶要做药代,不知道要不要再做代谢,
偶理解是只做动力学就可以了
.......[/quote]

随便说两句哈,作毒理主要是药物安全性评价,其实就是要人吃了没事。做代谢主要要是考察药物在体内的吸收分布和排泄,做药代的目的也有不同的,有的和药效结合起来,考察药物在血液或组织里的浓度与药效之间的关系,有的则善单纯的与现有的市售药品进行代谢比较,只要考察指标均符合要求,就可以报批。还有的是为了考察生物利用度或生物等小度。 [s:3]

蛇皮膏药 发表于 2006-12-4 16:22

<p>wenxian?版主说的真好 哈哈 [s:3] </p><p>临床前药代动力学研究的目的,是揭示新药在动物体内的动态变化规律,阐明药物吸收、分布、代谢和排泄的过程和特点,并根据数学模型提供重要的药代动力学参数,<font color="#ff0000" size="3">为在动物进行药理学和毒理学研究</font>,以及为临床合理用药的安全性和有效性研究提供依据。 </p><p>毒理是做<font size="3">药物安全性评价,其实就是看安全范围是多大剂量,急性/慢性服用的损害各是什么,对那些器官有损害。。。</font></p><p>二者内容不是并列,而是完全的两个不同的方面。</p><p>从<strong><font face="Gulim" color="#000066">emxz版主</font></strong>说的情况看来,这个药是老药,现在要做它在眼科的药代动力学,那么请问这个药有人做过它在眼科的药效学没有? 就是说在眼科使用是否有效这个问题? </p><p><font color="#9933cc" size="4">毒理学、药效学、药代动力学三者是不一样的研究内容 呵呵</font></p><p />

emxz 发表于 2006-12-4 22:47

呵呵
非常感激蛇皮膏药老师的精彩解答
这个药已经在眼科做过药效,毒理,现在就还剩药代(弱弱的问一句:这三项的研究有没有先后顺序)
但是我看了很多发表的文献,似乎都只是做了药物动力学,(难道药代=药物动力学?)
呵呵,恳请蛇皮膏药老师给我讲讲药物动力学(或者说药代)研究的思路(如技术路线之类的,呵呵,有点贪心)

蛇皮膏药 发表于 2006-12-5 10:22

<p><font size="3">[quote][b]引用第5楼[i]emxz[/i]于[i]2006-12-04 22:47[/i]发表的[/b]: 呵呵非常感激蛇皮膏药老师的精彩解答这个药已经在眼科做过药效,毒理,现在就还剩药代(弱弱的问一句:这三项的研究有没有先后顺序)但是我看了很多发表的文献,似乎都只是做了药物动力学,(难道药代=药物动力学?)呵呵,恳请蛇皮膏药老师给我讲讲药物动力学(或者说药代)研究的思路(如技术路线之类的,呵呵,有点贪心)[/quote]</font></p><p><font size="3">我不是老师 呵呵</font></p><p><font size="3">药代=药物动力学 这个是对的。 药代=药物代谢动力学</font></p><p><font size="3">药理=药物代谢动力学+药物效应学</font></p><p><font size="3">药代动力学我并没有做过,我从一些现有的知识和emxz兄讨论讨论。</font></p><p><font size="3">首先要确定药物代谢的数学模型</font></p><p><font size="3">1、<span style="FONT-SIZE: 12pt; LINE-HEIGHT: 150%; FONT-FAMILY: 宋体; mso-font-kerning: 0pt; mso-bidi-font-weight: bold; mso-ascii-font-family: ">单隔室模型</span><span lang="EN-US" style="FONT-SIZE: 12pt; LINE-HEIGHT: 150%; mso-font-kerning: 0pt; mso-bidi-font-weight: bold"></span></font><p /><p><span style="FONT-SIZE: 12pt; FONT-FAMILY: 宋体; mso-bidi-font-weight: bold; mso-ascii-font-family: ">即药物进入体循环后,迅速地分布于各个组织、器官和体液中,并立即达到分布上的动态平衡,成为动力学上的所谓“均一”状态,因而称为单隔室模型或单室模型。</span></p><p align="left"><font lang="ZH-CN" face="??ì?,SimSun"></font><font size="3">2.<font lang="ZH-CN" face="??ì?,SimSun">二隔室模型<font face="Verdana">(四)清除率<font size="2"></font></font></font></font></p><p align="left"><font size="3">3. <font lang="ZH-CN" face="??ì?,SimSun">多隔室模型</font> <font lang="ZH-CN" face="??ì?,SimSun">二隔室以上的模型叫多隔室模型,它把机体看成药物分布速度不同的多个单元组成的体系。</font></font></p><p align="left"><font size="3"><font lang="ZH-CN" face="??ì?,SimSun"></font></font></p><p align="left"><font size="3"><font lang="ZH-CN" face="??ì?,SimSun">几个概念:</font></font></p><p align="left"><font size="3"><font lang="ZH-CN" face="??ì?,SimSun">1、生物半衰期</font><font face="宋体, MS Song">Half-life time)</font><font lang="ZH-CN" face="??ì?,SimSun">简称半衰期,即体内药量或血药浓度下降一半所需要的时间,以</font><font face="宋体, MS Song">t1/2</font><font lang="ZH-CN" face="??ì?,SimSun">表示,单位为时间。</font></font></p><p align="left"><font lang="ZH-CN" face="??ì?,SimSun" size="3"></font></p><font size="3"><p align="left">2、消除速度常数</p><p align="left">消除是指体内药物不可逆失去的过程,它主要包括代谢和排泄。其速度与药量之间的比便常数<font face="宋体, MS Song">K</font><font lang="ZH-CN" face="??ì?,SimSun">称为表观一级消除速度常数,简称消除速度常数,其单位为时间的倒数,</font><font face="宋体, MS Song">K</font><font lang="ZH-CN" face="??ì?,SimSun">值大小可衡量药物从体内消除的快与慢。</font></p><p align="left"><font face="宋体">3、清除率</font></p><p align="left" /><p align="left"><font face="宋体" size="3">据我所知,实际上,是需要靠计算机来算的。所有的药物动力学软件计算的结果都不相同。这主要是算法和初始值设定的原因。而是你对药物和数学的理解,这样才可以提出合理的模型<br /><br />模型建立,计算实现的技术细节我就基本不懂了。其中涉及到非线性药物动力学、统计矩法、<font lang="ZH-CN" face="??ì?,SimSun">线性微分方程组等。</font></font><font face="宋体" size="3">国内搞的人非常少,主要集中在沈药和中国药科大学<br /></font></p><p align="left"><font face="宋体" size="3">向你推荐一个帖子:</font></p><p align="left"><font face="宋体" size="3"><a href="http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/159335_1.html">[url]http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/159335_1.html[/url]</a></font></p><p /><p align="left"></p></font><font size="3"></font></p><p><font face="Times New Roman"></font></p>

emxz 发表于 2006-12-9 23:46

多谢蛇皮膏药兄
但是我要做一种眼液的药代
似乎与口服及静脉药又有所区别
于是偶又有一些疑问:我看了很多发表的文献一般只做了泪液,角膜,前房的药代,不知后面如虹膜,晶体,玻璃体和视网膜是不是也要做?浓度有没有影响?要做几个浓度?时间点该怎样选取?还有预实验应该怎么做?还有一个问题是现在只在眼球局部做,没有对照标准药,没有静脉注射,那该药的生物利用度又怎么去衡量呢?
呵呵,有点罗嗦,希望蛇皮膏药兄不要见怪!

蛇皮膏药 发表于 2006-12-10 15:04

<p>[quote][b]引用第7楼[i]emxz[/i]于[i]2006-12-09 23:46[/i]发表的[/b]: 多谢蛇皮膏药兄但是我要做一种眼液的药代似乎与口服及静脉药又有所区别于是偶又有一些疑问:我看了很多发表的文献一般只做了泪液,角膜,前房的药代,不知后面如虹膜,晶体,玻璃体和视网膜是不是也要做?浓度有没有影响?要做几个浓度?时间点该怎样选取?还有预实验应该怎么做?还有一个问题是现在只在眼球局部做,没有对照标准药,没有静脉注射,那该药的生物利用度又怎么去衡量呢?呵呵,有点罗嗦,希望蛇皮膏药兄不要见怪![/quote] </p><p>嗯 问题够专业!!!</p><p>我的知识不够啦 这些是眼科专业的内容了 虽然我本科也是学医的:)</p><p>我看了看中文文献,似乎确实如同你所说,一般只作泪液,角膜,前房的药代,但也有做玻璃体的,第二篇就做了。</p><div align="left"><a href="javascript:EnterDetail(310600,0,'~-~KeyWord_C=药代动力学,眼~-~Title_C=药代动力学,眼','R','90450X','更昔洛韦原位胶化滴眼液兔眼部药物动力学及生物利用度研究','22422484');"><font color="#0000ff">更昔洛韦原位胶化滴</font><font color="#ff0000">眼</font><font color="#0000ff">液兔</font><font color="#ff0000">眼</font><font color="#0000ff">部药物动力学及生物利用度研究</font></a></div><div align="left"></div><div align="left"><a href="javascript:EnterDetail(1820668,8,'~-~KeyWord_C=药代动力学,眼~-~Title_C=药代动力学,眼','R','90450X','兔玻璃体腔注射国产美罗培南的药代动力学研究','20868606');"><font color="#0000ff">兔玻璃体腔注射国产美罗培南的</font><font color="#ff0000">药代动力学</font><font color="#0000ff">研究</font></a></div><div align="left"></div><div align="left">依据我的想法,要看你这个药的给药方式:</div><div align="left"></div><div align="left">1 滴眼药 可能就做一些眼部的各种液体就可以。因为药物主要在这些液体内发挥药效</div><div align="left">2 像有些药需要注射到眼球内部,如玻璃体、后房之类的,可能就要做其他的了</div><div align="left"></div><div align="left"><font color="#339900" size="3">至于“浓度有没有影响?要做几个浓度?时间点该怎样选取?还有预实验应该怎么做?还有一个问题是现在只在眼球局部做,没有对照标准药,没有静脉注射,那该药的生物利用度又怎么去衡量呢?”</font></div><div align="left"></div><div align="left">你这几个问题是你要做的实验内容,就是要你去做,否则都知道了,岂不是你测一下浓度之类就完了? 哈</div><div align="left"></div><div align="justify"><font color="#000000" size="2">回答:</font></div><div align="justify"><font color="#000000" size="2">1、 浓度肯定有影响。我们做药理,起码做3个剂量-----低、中、高,剂量需要你自己确定,乃至反复摸索。你可以加大到4-5个浓度。</font></div><div align="justify"><font color="#000000" size="2"></font></div><div align="justify"><font color="#000000" size="2">2、时间点是你的探索内容啊? 我怎么可能知道捏:) 多对比它原有的资料,以及它起效时间、代谢时间</font></div><div align="justify"><font color="#000000" size="2"></font></div><div align="justify"><font color="#000000" size="2">3、预实验。做上去,确定好浓度、时间点,取各部分组织液,摸索着干。</font></div><div align="justify"><font color="#000000" size="2"></font></div><div align="justify"><font color="#000000" size="2">4、生物利用度的这个问题我也不好说 呵呵</font></div>

emxz 发表于 2006-12-12 13:14

呵呵
在弱弱的问一句:
如果做三个浓度,三个指标(泪液,角膜,房水),取10个时间点
大概需要多少钱?(偶是指花在HPLC的费用)

wenxian? 发表于 2006-12-12 21:31

[quote][b]引用第9楼[i]emxz[/i]于[i]2006-12-12 13:14[/i]发表的[/b]:
呵呵
在弱弱的问一句:
如果做三个浓度,三个指标(泪液,角膜,房水),取10个时间点
大概需要多少钱?(偶是指花在HPLC的费用)[/quote]


没太接触过成本问题,用的时候都是到课题组里面拿就可以了。你这三个指标也要预处理吧!!!如果处理的不理想或要换方法的话,可能成本会提高啊!!还有就是每个点取多少,一共有多少都要算好,否则如果动物(你应该是用动物作吧,如果是用人,俺就彻底一点都不懂了哈)本身的泪液,角膜,房水没那么多,那你这药岂不是不能代谢了!!!!把取点时间算好,别冲突了,祝成功哈

蛇皮膏药 发表于 2006-12-13 00:45

<p>[quote][b]引用第9楼[i]emxz[/i]于[i]2006-12-12 13:14[/i]发表的[/b]: 呵呵在弱弱的问一句:如果做三个浓度,三个指标(泪液,角膜,房水),取10个时间点大概需要多少钱?(偶是指花在HPLC的费用)[/quote] </p><p>不懂这个了!!!</p><p>这都是拿到药分去做的 </p><p><!> 哈哈</p>

yannixxx 发表于 2007-1-13 20:12

请问楼主:

心梗药物的药理作用如何做?

本人刚刚接触这个方面

不是很懂

蛇皮膏药 发表于 2007-1-13 20:26

好久没人问问题了哈:)

要做心肌梗死药物的药理作用,我觉得首先要做好心肌梗死模型:

下面提供一种心肌梗死模型制备方法,其他方法也大同小异的
心肌梗死模型制备:进行大鼠冠脉结扎,于末次给药后1h,在乙醚麻醉下仰位固定于手术台,自左侧3~4肋间开胸,暴露心脏,于肺动脉圆锥及左心房间找出冠脉左前降支,立即结扎冠脉,将心脏送回胸腔,并挤出胸腔内血液和气体,迅速关闭胸腔,开胸时间不超过30s。空白对照组仅置缝线而不结扎冠脉。
参考文献:邓汉武,李元建,沈 乃,等.辽东槐木总苷对大鼠实验性心肌缺血的保护作用[J].中国药理学与毒理学杂志,1988,2(1):20-24

另外,兔子或狗的心肌梗死模型以后再讲。

[size=4][color=crimson]实验内容[/color][/size]
1.  对实验性急性心肌缺血的治疗作用
1.  对心电图的影响
2.  对心肌梗死范围的影响
3.  对血压和心率的影响
4.  对死亡率的影响

有条件的话可以做
a.  对Ⅱ导联心电图ST段抬高的影响
b.  对循环中内皮素、血栓素、6-酮-前列腺素的影响
c.  对血清心肌酶、肌酐的影响。肌酸磷酸激酶(英文缩写为CK) / 肌酸磷酸激酶同工酶(英文缩写为CK—MB)

先就说这么点,你先做起来再说吧。

[s:8]  [s:8]

祝你好运!

myie23 发表于 2007-1-22 23:03

我做大鼠大脑中动脉的血管环实验
我有几个小问题想请教:

1.我看过好多人用克氏液,楼主觉得用什么好,PSS和这些有什么区别?
2、大鼠的大脑中动脉制备方法。我老做不好,血管内皮活性老保不住,请问为什么呢?

谢谢了

蛇皮膏药 发表于 2007-1-22 23:17

[quote][b]引用第14楼[i]myie23[/i]于[i]2007-01-22 23:03[/i]发表的[/b]:
我做大鼠大脑中动脉的血管环实验
我有几个小问题想请教:

1.我看过好多人用克氏液,楼主觉得用什么好,PSS和这些有什么区别?
2、大鼠的大脑中动脉制备方法。我老做不好,血管内皮活性老保不住,请问为什么呢?
.......[/quote]

首先,祝你能够成功。大鼠的大脑中动脉制备还是有一定难度的,属于中等管径的血管。

[color=orangered]首先说说我自己的制备方法[/color]
1、大鼠的大脑中动脉制备方法:
将大鼠断头后,用剪刀在颅顶做正中切口,用血管钳撬开开颅顶颅骨,打开,完全暴露大脑皮质,然后用手术刀,沿颅底将与脑组织连接的神经切断,取出脑组织,将颅底向上放置,可以清楚看到大脑动脉交通或脑动脉环路了,剥离脑膜,取出大脑中动脉就可以了。自己试一试,很简单的。但是,要注意要轻手轻脚,最怕随意动作,破坏内膜 。

2、你说得克氏液问题,我个人认为K-H液也挺好,PSS液最近的文献说得多一点。但本质并没有太多不同。

生理盐溶液( Physiological Salt Solution,PSS),其成分为(mmol/L):NaCl 154.7, KCl 5.4, 葡萄糖11.0, CaCl2 2.5, Triss 6.0。
K-H液:NaCl:118 KCl:4.8 KHPO4:1.2 MgSO4:1.2 CaCl2:2.5 NaHCO3:25 Glucose:11

这两个液体都可以用来做血管的离体实验,都可以使用,看你使用的效果好坏了

最重要的需要95%O2+5%CO2,不满足的话,血管就容易死掉!另外,稳定时间也需要注意,最好不超过1H

祝你好运!  ^_^

蛇皮膏药 发表于 2007-1-22 23:21

上传一张大脑中动脉的照片,可以对照来做。照片不是我自己拍的,呵呵
[img]http://www.qudoo.net/photo.asp?id=4028808e104a068d01104a5fb08c00f0&ab.jpg[/img]

myie23 发表于 2007-1-25 14:05

谢谢

我取出的血管环总是对NE没有反应,这是怎么回事?

实验中影响血管环活性的因素有哪些请您详细讲讲好吗?

蛇皮膏药 发表于 2007-1-26 11:03

[quote][b]引用第17楼[i]myie23[/i]于[i]2007-01-25 14:05[/i]发表的[/b]:
谢谢

我取出的血管环总是对NE没有反应,这是怎么回事?

实验中影响血管环活性的因素有哪些请您详细讲讲好吗?[/quote]

首先来分析下对NE没有反应的情况

1、看看对phenylephine有没有反应。phenylephine俗名新福林,是最常用的血管收缩剂,如果有那就是你的NE失效了。

2、确认一下浴漕内温度,到底是不是37摄氏度。很多时候温度掉下去10分钟后 血管就开始失去活性。

3、还是气体的问题?  须知95% 氧气+ 5% 二氧化碳必须保证,否则张力直线下降

4、如果上面都没问题,那么我估计你的营养液很可能有问题。你需要重新配置一下你的PSS液了。严格调整PH值。

5、还有就是取血管的时候内皮活性是否还保留着,如果动作比较大的话,也是会损伤血管活性的。

蛇皮膏药 发表于 2007-1-26 11:06

其次,实验中影响血管环活性的因素有很多

上述的裕槽温度、营养液种类、pH值、药物的是否失效,以及取血管的动作大小等等都会影响血管收缩活性的。

还有,前负荷不可过大,稳定时间保持在0.5--1.0h之间,仪器是否校准了这些小细节都会有影响的

junewind25 发表于 2007-2-6 21:04

现在在做斑马鱼药物诱导心脏发育障碍的研究,有几个问题请教“
1。斑马鱼心脏发育的窗口期在受精后第12小时
2。我加药处理后我应该取哪几个时间点观察和取材做实验?
3。斑马鱼心脏发育成型心脏组织可提取的时间点在72-84小时,我如果想取心脏组织为研究对象的话,加药处理时间是不是必须要延后,但是错过心脏发育的时间窗,该实验是否已经没有了意义?
4。一般做芯片研究取几个时间点最为常用?
5。想同时兼顾心脏组织中MIRNA的研究,受精后12小时加药物诱导后的第一个时间点可不可以在第24小时?
6。其实最想问的是,我要构建心脏发育障碍的模型要在受精后第12小时加药处理,而MIRNA多数是在受精后第24小时有表达,心脏组织可分离却在第72小时。我很为难。理想的是设计是不是应该在加药后1小时,4,8,12小时取材,可那时心脏无法分离。我该怎么做?在72小时加药诱导是不是无法产生心脏发育障碍的模型而实验无有意义了?

我是学生物医学的,对于药理毒里学的实验不太了解,问题可能有点幼稚和罗嗦,不要见笑

蛇皮膏药 发表于 2007-2-6 21:57

[quote][b]引用第20楼[i]junewind25[/i]于[i]2007-02-06 21:04[/i]发表的[/b]:
现在在做斑马鱼药物诱导心脏发育障碍的研究,有几个问题请教“
1。斑马鱼心脏发育的窗口期在受精后第12小时
2。我加药处理后我应该取哪几个时间点观察和取材做实验?
3。斑马鱼心脏发育成型心脏组织可提取的时间点在72-84小时,我如果想取心脏组织为研究对象的话,加药处理时间是不是必须要延后,但是错过心脏发育的时间窗,该实验是否已经没有了意义?
4。一般做芯片研究取几个时间点最为常用?
.......[/quote]


首先只能先肯定一点:
在72小时加药诱导无法产生心脏发育障碍的模型而实验肯定无意义了!!


从你的描述中,我知道了斑马鱼心脏发育的窗口期在受精后第12小时,而斑马鱼心脏发育成型心脏组织可提取的时间点在72-84小时,而你又必须同时兼顾心脏组织中MIRNA的研究,对吧/?

一般说来,药物施加影响肯定要在某一关键时间,而在你的实验中,很有可能斑马鱼心脏发育窗口期---受精后第12小时是最重要的给药窗口!

你在12小时给药,24小时取mRNA,72小时观测心脏的发育情况,这是一连续、有效、可行的实验流程啊,正好对应了给药--mRNA表达--蛋白质表达这一干预过程的表现!

芯片研究现在已经不流行,不推荐你做此芯片研究  ^_^

junewind25 发表于 2007-2-6 22:52

谢谢,蛇兄的意见。我还要再想想。芯片还是有它的优势的。

蛇皮膏药 发表于 2007-2-28 14:56

芯片的意义在于高通量  大样本的检测  [s:11]  [s:11]

蛇皮膏药 发表于 2007-2-28 14:57

很多人做完了芯片都不知道芯片的优点及用途之所在  摘录点东西大家一起看看:

基因芯片的应用

在实际应用方面,生物芯片技术可广泛应用于疾病诊断和治疗、药物筛选、农作物的优育优选、司法鉴定、食品卫生监督、环境检测、国防、航天等许多领域。它将为人类认识生命的起源、遗传、发育与进化、为人类疾病的诊断、治疗和防治开辟全新的途径,为生物大分子的全新设计和药物开发中先导化合物的快速筛选和药物基因组学研究提供技术支撑平台。

1、药物筛选和新药开发

由于所有药物(或兽药)都是直接或间接地通过修饰、改变人类(或相关动物)基因的表达及表达产物的功能而生效,而芯片技术具有高通量、大规模、平行性地分析基因表达或蛋白质状况(蛋白质芯片)的能力,在药物筛选方面具有巨大的优势。用芯片作大规模的筛选研究可以省略大量的动物试验甚至临床,缩短药物筛选所用时间,提高效率,降低风险。

随着人类基因图谱的绘就,基因工程药物将进入一个大发展时期,在基因工程药物的研制和生产中,生物芯片也有着较大的市场。以基因工程胰岛素为例,当我们把人的胰岛素基因转移到大肠杆菌细胞后,我们就需要用某种方法对工程菌的基因型进行分析,以便确证胰岛素基因是否转移成功。过去人们采取的方法叫做“限制性片段长度多态性”(简称RELP),这种方法非常地烦琐复杂,在成本和效率方面都不如基因芯片,今后被芯片技术取代是必然的趋势。通过使用基因芯片筛选药物具有的巨大优势决定它将成为本世纪药物研究的趋势。

2、疾病诊断

基因芯片作为一种先进的、大规模、高通量检测技术,应用于疾病的诊断,其优点有以下几个方面:一是高度的灵敏性和准确性;二是快速简便;三是可同时检测多种疾病。如应用于产前遗传性疾病检查,抽取少许羊水就可以检测出胎儿是否患有遗传性疾病,同时鉴别的疾病可以达到数十种甚至数百种,这是其他方法所无法替代的,非常有助于“优生优育”这一国策的实施。又如对病原微生物感染诊断,目前的实验室诊断技术所需的时间比较长,检查也不全面,医生往往只能根据临床经验做出诊断,降低了诊断的准确率,如果在检查中应用基因芯片技术,医生在短时间内就能知道病人是哪种病原微生物感染;而且能测定病原体是否产生耐药性、对哪种抗生素产生耐药性、对哪种抗生素敏感等等,这样医生就能有的放矢地制定科学的治疗方案;再如对具有高血压、糖尿病等疾病家族史的高危人群普查、接触毒化物质人群恶性肿瘤普查等等,如采用了基因芯片技术,立即就能得到可靠的结果,其他对心血管疾病、神经系统疾病、内分泌系统疾病、免疫性疾病、代谢性疾病等,如采用了基因芯片技术,其早期诊断率将大大提高,而误诊率会大大降低,同时有利于医生综合地了解各个系统的疾病状况。

3、环境保护

在环境保护上,基因芯片也广泛的用途,一方面可以快速检测污染微生物或有机化合物对环境、人体、动植物的污染和危害,同时也能够通过大规模的筛选寻找保护基因,制备防治危害的基因工程药品、或能够治理污染源的基因产品。

4、司法

基因芯片还可用于司法,现阶段可以通过DNA指纹对比来鉴定罪犯,未来可以建立全国甚至全世界的DNA指纹库,到那时以直接在犯罪现场对可能是疑犯留下来的头发、唾液、血液、精液等进行分析,并立刻与DNA罪犯指纹库系统存储的DNA“指纹”进行比较,以尽快、准确的破案。

5、现代农业

基因芯片技术可以用来筛选农作物的基因突变,并寻找高产量、抗病虫、抗干旱、抗冷冻的相关基因,也可以用于基因扫描及基因文库作图、商品检验检疫等领域。目前该类市场尚待开发。

6、研究领域

包括基因表达检测、寻找新基因、杂交测序、基因突变和多态性分析以及基因文库作图以及等方面。1、基因表达检测。人类基因组编码大约10万个不同的基因,仅掌握基因序列信息资料,要理解其基因功能是远远不够的,因此,具有监测大量mRNA(信使RNA,可简单理解为基因表达的中介物)的实验工具很重要。有关对芯片技术检测基因表达及其敏感性、特异性进行的研究实验表明芯片技术易于监测非常大量的mRNAs并能敏感地反映基因表达中的微小变化。利用基因芯片技术人们已比较成功地对多种生物包括拟南芥、酵母及人的基因组表达情况进行了研究,并且用该技术(共157,112个探针分子)一次性检测了酵母几种不同株间数千个基因表达谱的差异。2、寻找新基因。有关实验表明在缺乏任何序列信息的条件下,基因芯片也可用于基因发现,如HME基因和黑色素瘤生长刺激因子就是通过基因芯片技术发现的。3、DNA测序。人类基因组计划的实施促进了更高效率的、能够自动化操作的测序方法的发展,芯片技术中杂交测序技术及邻堆杂交技术即是一种新的高效快速测序方法。如使用美国Affymetrix公司1998年生产出的带有13.5万个基因探针的芯片就可以使人类DNA解码速度提高了25倍。4、核酸突变的检测及基因组多态性的分析。有关实验结果已经表明DNA芯片技术可快速、准确地研究大量患者样品中特定基因所有可能的杂合变异。对人类基因组单核苷酸多态性的鉴定、作图和分型,人线粒体16.6kb基因组多态性的研究等。随着遗传病与癌症相关基因发现数量的增加,变异与多态性分析必将越来越重要

toxin 发表于 2007-7-18 18:49

[quote]引用第22楼junewind25于2007-02-06 22:52发表的 :
谢谢,蛇兄的意见。我还要再想想。芯片还是有它的优势的。[/quote]
看来你们的研究水平和手段还是不错的,芯片我还没有做过。

毕业忙着养家糊口,想起来惭愧,距离自己的人生目标有些偏离了。

toxin 发表于 2007-7-18 18:58

[quote]引用第15楼蛇皮膏药于2007-01-22 23:17发表的 :


首先,祝你能够成功。大鼠的大脑中动脉制备还是有一定难度的,属于中等管径的血管。

[color=orangered]首先说说我自己的制备方法[/color]
.......[/quote]
中脑动脉我的课题没有涉及到,我就没做。木有发言权。
其实说到KH
液还是krebs液的问题,这完全是个人习惯,在血管实验中,有人喜欢前者,有人喜欢后者,这都是无所谓的,实验方法的可重复性性能,决定了这方面的差别。。有人用前者可以重现,有人就不能重现,所以要改良配方,使更适合自己实验室的条件。仅此而已。
至于平衡时间,肯定要超过一小时的,我现在记不太清了,是不是两小时不是很确定了。反正一小时多是需要的。至于通气不通气,也要看个人条件,真正做实验的时候,如果气流无法做到稳定,而你的浴液可以做到内外温度均衡,那你可以选择不通气,勤换平衡液的方式,这都是可以灵活选择的,当然如果气流速度能精确可调,还是通气吧,而且真正做实验的时候,大多数实验室还是通纯氧气的,毕竟便宜。如何做实验,自己多注意,很多东西都是可以灵活变通的。比如血管的组织培养,有些我个人觉得无菌培养完全就是在牵强,根本不需要啊。

toxin 发表于 2007-7-18 19:05

[quote]引用第17楼myie23于2007-01-25 14:05发表的 :
谢谢

我取出的血管环总是对NE没有反应,这是怎么回事?

实验中影响血管环活性的因素有哪些请您详细讲讲好吗?[/quote]

如果没有活性,换KCL,看有无反应,如果有,说明你的NE本身见光分解,失效了,须知,儿茶酚胺类药物见光容易分解。如果你做实验把它放在台子上,过两个小时,那肯定完了,无效了。做实验要多动脑子,这些东西教科书上不会正经告诉你,但是特性都会告诉你,自己去分析。
如果KCL也无反应,此时说明,血管无活性。

影响活性的因素无非就是那么几个:
血管的自身性能,不要破坏血管平滑肌,不要伤害血管内皮。
平衡液:其成分,酸碱性,钙含量,PH值。
气体:
一一确证,问题应该不大。

tearain 发表于 2007-10-17 11:54

楼主有没有裸鼠肿瘤原位接种方面经验,我们要做肺部,希望请教下 [s:109]

zhimakm 发表于 2007-10-26 14:42

配出的K-H液是澄清的,37度充氧十多分钟后变浑浊了,怎么回事??
(已做过对照:37度,不充氧,不变浑浊)
难道充氧充多了,没道理啊。
浑浊遇酸消失。
请帮忙分析怎样避免.

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