极性相近生物碱的制备HPLC分离！！！
最近在做正丁醇的植化，从中分离两个生物碱，这两个生物碱极性非常接近，在薄层板上Rf值非常接近。。。 我将这两个生物碱结晶了，但得到的是这两个生物碱的混晶，量不大，总共也就20多mg吧。。现在我在用制备液相分，因为它们只有在末端有吸收，我用的波长是210和220nm， 洗脱剂甲醇－水，但甲醇在这两个波长有吸收，所以我只用等度洗脱，剃度洗脱峰形很恐怖。。。，但结果就是分不开（用过85，88，75％的甲醇浓度），请教各位高手，我该怎么处理能将这两个东西分开？？
想加碱，但我们那柱子不耐碱
转自dxy的讨论贴 菜鸟提点意见：
用乙腈或许可以分开，而且乙腈可以用梯度，因为他的最大吸收在190nm,基线比甲醇（205）影响要小。 建议用乙腈，或者换个检测器 我以前也碰到过类似的问题，我的解决方法是，装了一根长1M左右的ODS反相柱，加了点压，哈哈，分离效果比制备液相还要好。而且一次分离的量还相当大，可达1-2g，建议试试 可以用制备薄层来分。效果很好的 制备薄层是不敢了，量太少了，而且两者分离效果不好
乙腈和长的反相柱我去试试，就是乙腈贵了点，我用量很大。。。
多谢各位啊
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