LH-20装柱时产生很多气泡该怎么处理？
请教各位前辈，我打算用LH-20分离硅胶柱中用氯仿冲下来的一个东西，TLC用正己烷－二氯甲烷（7：3）点板有三个斑点，分离的还行。上凝胶柱时也就用这个比例。凝胶之前是用甲醇浸泡的，将凝胶真空抽滤后我用正己烷－二氯甲烷（7：3）的溶剂又溶涨了三天，时时搅拌，令其充分溶涨，但上柱时依然出现很多气泡，我的洗脱液就用等度，没走梯度。而且凝胶还有粘壁现象，不容易冲洗，不知是什么原因，是我有什么地方操作不正确吗？还盼高手指点迷津。转自dxy 楼上这样说吧，其实我觉得还真是很难回答你的这个问题，但是那我想从下面几个方面来说这个问题：
1 凝胶柱和硅胶柱有着本质的区别，适应于硅胶柱的条件对于凝胶来说不一定合适，所以你用正己烷－二氯甲烷（7：3）来过凝胶柱就不一定合适，至少我没有见过和听说过用这样的系统来进行凝胶洗脱的。
2 凝胶柱灌柱之前最好要脱气，这样含有的气体才会少，只是静止明显是不够的。
3 凝胶柱在分离过程中不存在梯度的问题，只要恒梯度就可以了。凝胶柱是分子筛原理，同时也有部分的吸附作用，因此换梯度一般不会起到很好的作用。
4 一般用凝胶柱分离小极性的物质，体系一般为（氯仿：甲醇＝1：1），而对于相对较大极性的一般用(甲醇或者甲醇：水体系）。
5 灌柱一定要小心，这个直接影响到你的柱校的，首先在柱子里边加入适当溶液（个人经验加到柱长的2/3吧），然后将脱好气的填料用个吸管沿柱子边慢慢加入，下边可以打开让溶液慢慢流出，这样知道整个柱子装好（注意中间不要等填料沉实时再加填料，那样会出现断层）。
6 凝胶柱上样的时候一定要充分溶解，因此所选用的系统也对药品要很好的溶解性，否则不但影响效果，还会浪费样品损坏柱子。
7 上好样后，流速一定不要太快，否则就不会很好的起到分子筛的作用。
好了，就先说这些吧，但愿对你有用吧。 我也没有听说过用正己烷-二氯甲烷系统洗脱的。
还有凝胶本身好像就粘管壁，弄到手上滑滑的，像珍珠粉。
9001000战友说得对，我曾经分几次把填料倒进柱子中，结果断层厉害。 谢谢两位高手的指教。获益匪浅。
因我之前在园子里曾看到有人用正己烷－二氯甲烷－甲醇体系的，据说分离效果不错。之所以只用正己烷－二氯甲烷体系，是因为我的化合物极性较小，加入甲醇后斑点全跑到前沿了，因此自做主张去掉甲醇，实在也是第一次用凝胶柱，让前辈们见笑了。
还有想问一下，9001000前辈说凝胶上柱前需脱气，请问是用超声的方法吗？那样对凝胶会否有损害，因我曾看到有人说凝胶不可以剧烈搅拌的。若不是用超声那又是用何种方法呢？还望赐教。
还有你说灌注前在柱子中加2/3的溶液，那凝胶里混合的溶液就不能过多了吧，那会不会影响他的流动性？我之前上柱都是直接倾倒的，下次试试你所说的吸管加入。在此先谢过了。 哦，谢谢您这么及时给我回复。
上次我上样之前也用真空抽滤过，抽完之后再用洗脱剂浸泡，只是泡完后没有抽气直接上柱了，不知是否是因为这样才容易产生气泡。 我也用过点，感觉你那洗脱剂确实没听说过，我认为洗脱剂只要对样品的溶解度稍好就ok了，硅胶的 条件一点都没关系，由于葡聚糖一般都用小竹，充分浸泡后，我不脱气也没见到有气泡呀！ 如果你的物质极性较小,你可以试试环己烷_氯仿-甲醇(3:1:1)体系! 我们的葡聚糖凝胶一般都用小柱子，浸泡后直接装柱，没有脱气，也没有见到气泡。
葡聚糖凝胶的沉降很慢，因此装柱的时候要预先加入一些溶剂，慢慢用滴管转移，柱子装好是分离成功的一半。 你用环己烷_氯仿,这样的柱子中凝胶很容易飘起来的.我想这是起泡的原因吧. 至于脱气嘛,在下是放在锥进瓶中,摇几下,再静置一晚就行了 终于忙完手头的实验，按照各位前辈的指点，今天上午开始装柱。采用氯仿－甲醇（1：1）为洗脱剂，装柱时柱中预留一部分溶剂，用滴管慢慢转移，流速较慢，待凝胶自然沉降后，果真没有出现气泡，只是柱面不是很平，稍稍有点倾斜，不过真的很感谢各位，装柱成功让我很有成就感。接下来就看它的分离情况了，就像faniory战友说的，柱子装好是分离成功的一半。静待结果！
再次感谢各位前辈！
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