为什么上柱没有斑点出来?
薄层上跑50:50的比例出来三个点,梯度洗脱从10;90开始,每100毫升收集一瓶,20:80的比例柱子上开始有色带的移动,但是收集下来的液体浓缩以后在20:80的展开条件下没有斑点?这是什么原因呢?是不是应该还在50:50的展开条件下跑版呢? 继续冲柱还是没有斑点吗?
在50:50 的条件下有三个点,在20:80的条件下不一定能冲出来的,也许你看到的色带并不是起先50:50条件下的点
也可以选用一下其他的展开剂试试 你50:50跑出来的三个点的Rf值怎么样?如果很小的话20:80冲下来的可能是色素,你要的斑点应该没出来,继续冲,冲完你要的点应该都会出来 我把展开剂极性调高了,换成50:50的之后可以了,出来了一个绿色的斑点,肉眼就可以看见,现在有一个问题。
就是如果瓶子肉眼看是透明的,那么上样出来也没有点,如果瓶子可以看见是绿色的,上样出来就有一个绿色的点。
我这个绿色的点难道是叶绿素之类么? 一般叶绿素都是有荧光的,好像是淡蓝色荧光,硫酸-乙醇显色呈红色。爬板看一下不就知道了。叶绿素一般都是在石油醚部位的,而且应该在石油醚-乙酸乙酯2:1左右开始冲下来。记得我做石油醚部位的时候实在B-谷甾醇之后下来的。你的极性梯度,倒是有点像是叶绿素。
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