[讨论]如何用DAD检测器检查一个峰的纯度?
请问各位高手,老板 要求用DAD检测器检查峰纯度,在一个波长下,可是我只做出了时间,吸光度值和波长的三维图,找不出要求的那种.哪位做过,请赐教一二 峰纯度的检查有很多办法，常见且简单易行的方法有：1）光谱比较法：即对一个峰的上升阶段，峰顶及下降阶段的UV光谱图（DAD很容易得到UV的）进行重叠比较。可以在要检查的峰上选择3~7个点进行比较，这种办法比较简单。2）建立吸收比率图：因为一个纯化合物在两个不同的波长下，其响应值的比例应该是个常数，选择两个不同的波长下要检测峰在不同时间点的响应值的比值与时间画图，如果是一条直线则可判断为纯峰。
你老板要求你在一个波长下检测峰纯度，可能是要你采用方法1）进行UV光谱比较来判断，但这种提法本身有问题，一个波长如何得到UV呢（假如你没有DAD，你能做到吗？你有DAD怎么又会是一个波长呢？）？
另外，一些DAD工作站还提供了更精确的峰纯度评价及计算方法，可以参考相关的说明书进行检测。
请参考。 我知道的峰纯度评价的两种方法：
1、两种不同类型流动相进行分离，然后检查是否有杂峰出现。
2、DAD检测器的软件工作站可以给出一个峰纯度评价曲线。我用的是Waters的色谱及工作站，它的峰纯度曲线的原理是这样的，即：将色谱峰其他位置的光谱图与色谱峰最高点的光谱图进行比较，得到一个评价因子，就是纯度角，它的范围是0~90度，越小表示两个光谱越接近，也就是峰越纯。你老板说的在一个波长下检查峰纯度不太可能（因为是连续波长的光谱比较，单波长应该用第一种检查方法）。 要进行峰纯度检测，如果你的仪器是安捷伦1100的话，选择SPECTRA菜单下SELECT PEAK PURITY，进入峰纯度检测画面，选中峰纯度检测工具后，在色谱图上单击要进行纯度检测的色谱峰即可判断该色谱峰是否为纯净物质的流出峰。不同的工作站版本，峰纯度检测画面会不一样。 峰纯度检测就是确认一个色谱峰是纯净物质还是含有其他物质的过程。这个过程是要依靠峰流出中所记录到的光谱进行比较而实现的。通常对每个峰以三个光谱图来确认纯度。
其中两个光谱取自于固定点（斜率上升点和斜率下降点），另一个取自于最高点（最高点或顶点光谱）。如果需要，还可以选择5、7、9或者ALL光谱图来进行纯度计算。如果这些光谱不相同，理论上讲这个峰含有不纯物。这种光谱不纯可能是由一个或多个化合物引起的，也可能是由背景吸收引起的。 谢谢大家的热情帮助，我用的是安捷伦的1100，曾经按照楼上所说从软件中检查峰纯度。我得任务是制标准品，现在已经得到了一部分固体，然后得任务就是定性定量。首先检查峰纯度。老板的大致意思是：如果是一个纯峰，色谱图上只会出现一个峰，然后从三维图上看这个峰的后面，如果还有其他峰，说明这个不是纯物质，如果无论从那个角度看，都是一个小土丘形状，那就是一个纯物质。但是他没有说那个三维图的Z轴表示的是什么，但是肯定不是波长。我也问了周围的人，大家都不明白。 X轴代表时间，Y轴代表波长，Z轴代表电压！！ 那这个图和我得出的还是一样的吧，因为电压的强度是不是也就代表了吸光度值的强度？还是时间、波长、吸收值的三维图吧？如果其中一个还是波长的话，我认为是不能检查出纯度的，因为一种物质可以在不同的波长下都有吸收 你用的是安捷伦的1100,那你们那里应该有安捷伦1100的高级操作培训教材吧?
里面从126至141页有很详细的峰纯度检测讲解,我想你最好还是找来看看,再对照你的图谱操作,这样你也许会很快就弄明白的!在这里说我也不知道怎么说才能说清楚? 安捷伦1100的高级操作培训教材中虽然有关于纯度的检测方法，但并不是很适用的，我曾经跑过很多图，用光谱比较法（即对一个峰的上升阶段，峰顶及下降阶段的UV光谱图（DAD很容易得到UV的）进行重叠比较。可以在要检查的峰上选择3~7个点进行比较），得到的结论是单一物质，但按教材上的方法我取一段波长下的图谱算出来的因子数小于他自己自动给出的参照因子数，也就是物质不纯的结论。但我用质谱做这个样品，结论还是纯物质。而且有时候参照因子还是自己人为设定的，就更缺乏准确性了。所以单用因子的方法确定纯度并不是很可取得。
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