关于蛋白结合率的测定
想请问大家下下。蛋白结合率测定中怎么确定浓度呢？查了些文献，发现测定蛋白结合率的标准曲线和该药物体内药动学的标准曲线范围相差甚大。透析内液甚至有几十倍的差异。为什么呢？对于浓度规定的原理一直不明白，书上也找不到～～大侠们帮帮忙～～谢谢了～～from dxy 1．首先，我想楼主可能对血浆蛋白结合率的概念，考察的目的不是很明确。血浆蛋白结合率是临床前药物动力学研究的一项重要内容。如果一个药物的血浆蛋白结合率高，则表明药物与蛋白结合的程度高，就不容易解离，药物就不容易到达靶器官，药物起效慢。
2．血浆蛋白结合试验，应至少选择高中低三个浓度（包括有效浓度在内），每个浓度至少重复试验3次，以了解血浆蛋白结合率是否存在浓度依赖性。同时用多次试验来消除单次试验所产生的偶然误差，这样的结果才有统计学上的意义。
3．血浆蛋白结合率=（袋内药物浓度-袋外药物浓度/袋内药物浓度）*100%。因此，它只是一个浓度的比值，只需要测出达到平衡时袋内袋外的浓度就可以了，不需要做标准曲线，不知道楼主是什么用意？
4．实验中有一些事项需要注意，以免造成数据上的误差。
a.实验前,应该将透析袋放在水或缓冲液中浸泡数小时,以防止膜破裂,可用3% 三氯醋酸检查是否有蛋白泄漏。
b.可用混合血浆蛋白,来消除不同个体血浆蛋白组成和含量上的差异。
c.透析液中的磷酸钠有抑制酸性药物与蛋白结合的作用,酸性药物实验时,应用较低浓度的磷酸钠( 一般0.06M),同时适量的加入一些中性盐,以消除Donnan效应。
d.实验温度和透析平衡时间影响也很大，一般都在37度,空气浴中震荡加速平衡。如果药物不稳定,可以采用低温或加入适量的稳定剂。透析时间的确定,可以做对照实验,用血浆代替同体积的缓冲液,测定袋内外达平衡时的时间。
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