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xinren 发表于 2007-3-22 10:04

请教越橘提取物中花青素的检测方法

  请教各位大虾越橘提取物中花青素的检测方法,UV和HPLC都行,谢谢!

pengyao0616 发表于 2007-3-22 10:24

紫外可见分光光度法测定越橘中花青素  

一、    摘要:

此方法是用紫外可见分光光度法测定越橘提取物中花青素的含量。其数据分析是依据锦葵花素的氯化物的标准曲线计算花青素的百分含量。

二、    安全性:

a)   甲醇是可燃性物质,必须远离热源、火源。应避免吸入甲醇蒸气,避免接触到皮肤、眼睛和衣服上。不慎接触到应立即用水冲洗干净。

b)   盐酸是酸性物质,具有挥发性。应避免吸入HCL气体,应避免接触到皮肤、眼睛和衣服上。不慎接触到应立即用水冲洗干净。

三、    试剂:

1、       锦葵花素标准品—Chromadex

2、       2%盐酸-甲醇- 精密量取2ml甲醇至100ml容量瓶中,加甲醇定容,混合均匀,备用。

四、    仪器:

1、       Perkin Elmer Lambda 25 紫外可见分光光度计

2、          赛多利斯 BP211D 电子分析天平

3、       B2200S-T 超声波台式清洗器

4、       上海医用分析仪器厂 TGL·16G台式高速离心机

5、       Gilson 微量取样器

6、      10 ml容量瓶, 25ml容量瓶,100ml容量瓶

五、标准液的配制:

1、       精密称定0.15mg锦葵花素至25ml容量瓶中,用2%的盐酸甲醇溶解,超声15分钟,冷却至室温后再用2%盐酸甲醇定容,待用。

2、       分别精密移取上述溶液2ml,4ml,6ml到10ml容量瓶中,用2%的盐酸甲醇定容。锦葵花素标准品的浓度分别为0.0012mg/ml,0.0024mg/ml,0.0036mg/ml。用2%的盐酸甲醇作空白。分别测定他们在550nm处的吸光度值。通过吸光度值与浓度的比值计算出斜率Kl。

六、    操作步骤:

精密称定10mg样品到25ml 容量瓶中,2%的盐酸甲醇溶解,超声15分钟,冷却至室温,用2%的盐酸甲醇定容。2%的盐酸甲醇作空白。在535nm处测定其吸收值。

七、计算:

    花青素的含量(%)=A×Kl×D/W×100%

    式中:  A 为535nm处的吸光度

         Kl 为标准曲线斜率

         D 为稀释倍数

         W 为供试样称样量(mg)

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