毛细管电泳的原理和运用讲座 转自dxy
1 HPCE的基本理论与凝胶电泳的理论相同，电场强度是外加电压和毛细管长度的简单函数。2 淌度：由分子所受的电场力与其通过介质时所受的摩擦力的平衡所决定，带电量大的物质具有的淌度高，带电量小的物质淌度低。
3 电渗流（EOF）：是HPCE操作中的一个基本组成部分，电渗流是毛细管内壁表面电荷所引起的管内液体的整体流动，来源于外加电场对管壁溶液双电层的作用。
Zeta电位：主要由毛细管表面电荷所决定，由于pH控制毛细管表面的电荷，该电位受溶液的酸碱性影响极大。
4 溶质与管壁的相互作用 引起的主要原因：阳离子溶质与负电表面之间的离子相互作用和疏水相互作用
解决方法；增加缓冲液的浓度可以降低有效表面电荷来减小溶质与管壁相互作用；高离子强度可以降低电渗流，增加溶质在毛细管中的停留时间，常选用两性离子缓冲体系，以减少因电流增加而引起的焦耳热的限制。 5 在极端pH条件下进行分离：在高pH条件下，毛细管壁和溶质都将电离而带负电，溶质与管壁的相互作用因电荷之间的排斥而受到限制；在的pH条件下，石英表面硅羟基主要以不带电的质子化形式存在，电渗流接近为零。
对毛细管进行涂层处理。
6 缓冲试剂的浓度的控制 缓冲试剂的浓度一般控制在10-200mmol/L之间，电导率高的缓冲试剂如磷酸盐和硼砂等，其浓度多控制在20mmol/L附近，而电导小的试剂如硼酸及HEPES等，其浓度可在100mmol/L以上，有时为了抑制蛋白质吸附等特殊目的，可采用0.5mol/L以上的浓度，此时，要注意减少分离电压.
7 毛细管电泳的操作方式 毛细管区带电泳 胶束电动色谱 毛细管凝胶电泳
等电聚焦 等速电泳
8 CZE的应用 CZE的应用主要集中在生物领域，如多肽和蛋白质的分析，糖蛋白分析药物及其代谢产物分析，无机离子及有机酸分析等。 MEKC的分离机理为以表面活性剂形成的胶束作为准固定相，根据溶质分子在胶束准固定相和水溶液相之间的分配差异达到分离的目的。这种分离模式的提出使得电泳方法不仅可以用于带电离子的分离同时也可以用于分离中性分子，大大拓宽了毛细管电泳方法的应用范围。表面活性剂在MEKC中起着极其重要的作用，目前已有许多种表面活性剂被用于MEKC中的准固定相，而且新型表面活性剂胶束相包括手性表面活性剂和具有长脂肪链可以产生稳定胶束的表面活性剂的发展已成为一个非常活跃的研究领域 要有好的毛细管电泳的重现性，就要柱内壁在每次进样前保持一致，所以NaOH冲非常重要，不行的话可以提高浓度。冲过后，依次用水和缓冲液冲，除去NaOH. （若有碱性物质吸附，可间或用1NHCL冲一下。）
我感觉大多数物质在硼砂缓冲液（pH高）中的重现性好。在磷酸盐缓冲液（pH低）中的重现性较差。 只要冲的好，重现性就有保证。
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