HPLC同一对照品同一条件同一进样量，为什么峰面积不同？
我用的是岛津手动液相，十几年的老液相了，工作站是前几年换的，前几天连续进了两针对照品，都是5微升，条件都一样，为什么峰面积会相差好多呢？请高手指教 那不会是你的灯有问题??以前有过这种现象么?? 你的定量环是多大的？为何进5微升？
还有，你的供试品溶液浓度是多少？峰面积是多少？什么工作站？
泵压力、流速等仪器方面的参数都正常哈？ 手动进样5微升，是一项很强的技术活，样品浓度低还好，浓度高就真的很难做了，您应该考虑使用满定量环进样 首先考虑你的仪器是否处于正常状态，如柱压是否稳定，是否漏液等等。
不知你是用手动定量环进样还是直接微量进样器5微升进样。如果是定量环两针重复性会较好的，不过5微升的定量环似乎少见；如果是微量注射器直接手动进样，误差大可能与使用的进样器读数关系大，建议使用10或5微升的微量进样器。
峰的对称性、积分参数设置等也会影响你的结果，请检查两次峰形、积分参数等。
溶液的浓度太高或太低也会影响两针的峰面积重复性。
不知你计算的两针RSD究竟多少，如果小于2.0%，应该也是符合要求的，当然越小越好。 既然是老液相系统了，会不会问题出在泵输液不准确上呢，十几年了换过柱塞杆密封圈吗？还有进样阀会不会有问题啊，转子密封换过吗？
请楼主从这两方面考虑一下。
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