肽的分离与纯化技术研究(原创)
肽的分离与纯化技术研究分离肽的技术很多,有离子交换色谱(IEC )、疏水色谱(HIC )、高效液相色
谱(HPLC )、反相高效液相色谱(RPLC)、电泳等。但要纯化和制备达到药品级
要求,IEC和RPLC是主要的方法。电泳仅用于肽小规模纯化,不能用于肤的大
规模分离。
根据多肽粗品的来源、对纯度的要求和活性的保持等,选择合适的纯化方案
是关键的一步。多肽的分子量较小,二级结构较少,一般不含有三级结构,所以
在纯化过程中,多肽分子的活性容易保持。因此在多肽的纯化中,产品的纯度和
收率是首要的考虑因素。液相层析具有操作简便、分离效果好等优点,往往是多
肽纯化的首选。
固相化学合成的肽粗品中,一般含有大量结构、性质与目标物相近的杂质,
这是因为在多肽的合成过程中副反应肽、缺失肽、分支肽和空心肽的产生。这些
杂质给后续的纯化带来很大的困难。一方面要提高多肽合成的效率,提高目标物
的含量;另一方面要采用高效的分离手段。对于制备少量产品,通过一步反相
高效液相色谱或高效的离子交换色谱就能够得到足够的纯度。如果要较大量的制
备,一般要通过几步才能达到。第一步往往是采用高效或中等分离度的离子交换
色谱,接着用反相高效液相色谱来最终纯化
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