细胞融合[cell fusion]
[font=arial]通过培养和诱导,两个或多个细胞合并成一个双核或多核细胞的过程称为细胞融合(cell fusion)或细胞杂交(cell hybridization)。[/font][font=arial]基因型相同的细胞融合成的杂交细胞称为同核体(homokaryon);来自不同基因型的杂交细胞则称为异核体(heterokaryon)。[/font]
[font=arial]同种细胞在培养时2个靠在一起的细胞自发合并,称自发融合;异种间的细胞必须经诱导剂处理才能融合,称诱发融合。[/font]
[font=arial]诱导细胞融合的方法有三种:生物方法(病毒)、化学方法(聚乙二醇PEG)、物理方法(电激和激光)。某些病毒如:仙台病毒、副流感病毒和新城鸡瘟病毒的被膜中有融合蛋白(fusion protein),可介导病毒同宿主细胞融合,也可介导细胞与细胞的融合,因此可以用紫外线灭活的此类病毒诱导细胞融合。化学和物理方法可造成膜脂分子排列的改变,去掉作用因素之后,质膜恢复原有的有序结构,在恢复过程中便可诱导相接触的细胞发生融合。[/font]
[font=arial]细胞融合不仅可用于基础研究,而且还有重要的应用价值,在植物育种方面已经成功的有萝卜+甘蓝、粉蓝烟草+郎氏烟草、番茄+马铃薯等等。[/font]
[font=arial]单克隆抗体技术是细胞杂交技术的成功应用(图2-27),正常淋巴细胞(如小鼠脾细胞)具有分泌抗体的能力,但不能在体外长期培养,瘤细胞(如骨髓瘤)可以在体外长期培养,但不分泌抗体。于是英国人Kohler和Milstein 1975将两种细胞杂交而创立了单克隆抗体技术,获1984年诺贝尔奖。[/font]
[font=arial][img]http://www.21cnbio.com/experiment/UploadFiles_3501/200610/20061019184321910.jpg[/img][/font]
除了仙台病毒、副流感病毒和新城鸡瘟病毒以外,还有很多病毒具有融合蛋白。
天然状态下,来源于正粘病毒科、副粘病毒科、逆转录病毒科、冠状病毒科、纤丝病毒科的有包膜病毒的包膜糖蛋白具有相似的结构和功能,均被归入I类病毒融合蛋白。这些病毒包括正粘病毒科的流感病毒,副粘病毒科的呼吸道合胞病毒、麻疹病毒、副流感病毒、新城疫病毒,逆转录病毒科的人类免疫缺陷病毒(HIV)、猴免疫缺陷病毒(SIV)、人T细胞白血病病毒(HTLV) 、鼠白血病病毒(MLV),冠状病毒科的SARS冠状病毒、人类冠状病毒,以及纤丝病毒科的埃博拉病毒等。通常情况下,这些病毒的包膜糖蛋白以同源三聚体形式存在,这些三聚体形式的包膜糖蛋白介导了病毒与靶细胞表面受体的特异性结合,及病毒包膜与靶细胞膜融合的过程。
利用这些病毒介导的融合试验不仅可以应用于以上所述的研究,还可应用于相应病毒抑制物的筛选。目前世界上最新的HIV-1多肽类很小分子抑制药物,都通过这种试验筛选。
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