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eboat1983 发表于 2007-9-25 08:59

在下是个化学方面的菜鸟,请各为XDJM不吝支招

第一、我该如何选择填料,目下的实验基本属于天然产物分离,所不同的是产物不是在植物体中,而是在培养的细胞中,一切都是未知的,我们实验室的HPLC上在一定波长下出现了几个峰,于是乎,老板就让我把这几个物质全部分离出来,同志们哪,我该怎么做呢?我想我们感兴趣的大概都是一些极性比较小的物质吧?我是选用粗分效果比较好的树脂呢,还是选用常用的硅胶呢?
第二 、我做了两天的预实验,用TLC摸洗脱条件,初步打算是用氯仿/醇系统,可是我看书上说淋洗剂用TLC分析得到的展开剂的比例再稀释一倍后的溶剂,这我就不明白了,比如说我找到一个比较好的条件(氯仿:甲醇=9:1)可是淋洗的时候我该用什么浓度呢?? 怎么个“稀释”法。

kl128 发表于 2007-9-25 20:28

我的建议是
1.首先初分一下,过短柱(硅胶柱,氯仿/甲醇),除去细胞裂解产生的蛋白质和肽类。
2.由于你的产物多,我建议梯度洗脱,首先用乙酸乙酯/石油醚体系,逐渐增大极性,最后过渡到氯仿甲醇体系。

gcliao 发表于 2007-12-28 20:14

我有同学也是作发酵提取的,不过他是先用过大长柱,除去细胞裂解产生的蛋白质和肽类,同时用梯度洗脱,首先用乙酸乙酯/石油醚体系,逐渐增大极性,最后过渡到氯仿甲醇体系。这样可以把产物分为几段,然后再用小柱分,想一次到位很难啊。

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