固相萃取5个步骤
[align=left][font=仿宋_gb2312]固相萃取的五个步骤[/font][font=仿宋_gb2312][/font][/align][size=3][font=仿宋_gb2312]固相萃取过程要求样品以溶液形式存在，没有干扰，而且有足够的浓度以被检测。固相萃取的发展过程分为五步：[/font][font=times][b][font=仿宋_gb2312] [/font][/b][font=仿宋_gb2312]
[/font][/font][/size]
[b][font=仿宋_gb2312][font=times][/font]
[/font][/b]
[b][font=仿宋_gb2312]第一步[/font][/b][b][font=仿宋_gb2312][font=times] [/font][/font][/b][b][font=仿宋_gb2312]选择萃取管或片[/font][/b][b][font=仿宋_gb2312]
[/font][/b]
[align=center][font=仿宋_gb2312]
[/font][/align][align=center][font=仿宋_gb2312][font=times][/font]
[/font][/align][font=仿宋_gb2312][size=3]注意：建议固相萃取片用于大体积样品、含有大量颗粒或处理时需要很高流速的样品。[/size][/font]
[font=仿宋_gb2312][font=times][/font]
[/font]
[font=仿宋_gb2312]选择固相萃取管或片：[/font][font=仿宋_gb2312]吸附剂类型[/font][font=仿宋_gb2312]
[/font]
[table=343][tr][td=2,1,343][b][font=仿宋_gb2312]样品基质是水溶液[/font][/b][b][font=仿宋_gb2312]
[/font][/b]
[/td][/tr][tr][td=2,1,343][font=仿宋_gb2312]分析物更溶于水[/font][font=仿宋_gb2312]
[/font]
[/td][/tr][tr][td=2,1,343][font=仿宋_gb2312]带电荷[/font][font=仿宋_gb2312]
[/font]
[/td][/tr][tr][td=2,1,343][align=left][font=仿宋_gb2312]弱阴离子和酸性：使用[/font][font=仿宋_gb2312][font=times]LC-SAX[/font][/font][font=仿宋_gb2312]或[/font][font=仿宋_gb2312][font=times]LC-NH[sub]2[/sub][/font][/font][font=仿宋_gb2312]管[/font][font=仿宋_gb2312]
[/font][/align][align=left][font=仿宋_gb2312]强阴离子和酸性：要回收萃取分析物使用[/font][font=仿宋_gb2312][font=times]LC-NH[sub]2[/sub][/font][/font][font=仿宋_gb2312]管，[/font][font=仿宋_gb2312]
[/font][/align][align=left][font=仿宋_gb2312]不回收萃取分析物使用[/font][font=仿宋_gb2312][font=times]LC-SAX
[/font][/font][/align][align=left][font=仿宋_gb2312]弱阳离子和碱性：使用[/font][font=仿宋_gb2312][font=times]LC-SCX[/font][/font][font=仿宋_gb2312]或[/font][font=仿宋_gb2312][font=times]LC-WCX[/font][/font][font=仿宋_gb2312]管[/font][font=仿宋_gb2312]
[/font][/align][align=left][font=仿宋_gb2312]强阳离子和碱性：要回收萃取分析物使用[/font][font=仿宋_gb2312][font=times]LC-WCX[/font][/font][font=仿宋_gb2312]管[/font][font=仿宋_gb2312]
[/font][/align][font=仿宋_gb2312]不回收萃取分析物使用[/font][font=times][font=仿宋_gb2312]LC-SCX[/font][font=仿宋_gb2312]
[/font][/font]
[/td][/tr][tr][td=2,1,343][font=仿宋_gb2312]中性[/font][font=仿宋_gb2312]
[/font]
[/td][/tr][tr][td=2,1,343][font=仿宋_gb2312]如果分析物很难用反相填料（如酒精、糖、甘醇）萃取，可试用[/font][font=仿宋_gb2312][font=times]ENVI-Carb[/font][/font][font=仿宋_gb2312]或[/font][font=仿宋_gb2312][font=times]ENVI-Chrom P[/font][/font][font=仿宋_gb2312]管，或用反相萃取[/font][font=仿宋_gb2312][font=times]LC-SAX[/font][/font][font=仿宋_gb2312]或[/font][font=仿宋_gb2312][font=times]LC-SCX[/font][/font][font=仿宋_gb2312]管除去干扰物。[/font][font=仿宋_gb2312]
[/font]
[/td][/tr][tr][td=2,1,343][font=仿宋_gb2312]分析物更溶于有有机溶液[/font][font=仿宋_gb2312]
[/font]
[/td][/tr][tr][td=1,1,82][font=仿宋_gb2312]带电荷[/font][font=仿宋_gb2312]
[/font]
[/td][td=1,1,261][font=仿宋_gb2312]试用反相或离子交换萃取[/font][font=仿宋_gb2312]
[/font]
[/td][/tr][tr][td=1,1,82][font=仿宋_gb2312]中[/font][font=仿宋_gb2312][font=times] [/font][/font][font=仿宋_gb2312]性[/font][font=仿宋_gb2312]
[/font]
[/td][td=1,1,261][font=仿宋_gb2312]试用反相萃取[/font][font=仿宋_gb2312]
[/font]
[/td][/tr][tr][td=2,1,343][b][font=仿宋_gb2312]样品基质是有机溶液[/font][/b][b][font=仿宋_gb2312]
[/font][/b]
[/td][/tr][tr][td=2,1,343][font=仿宋_gb2312]挥发浓缩分析物，然后将其溶解在另外一种溶剂中。[/font][font=仿宋_gb2312]
[/font]
[/td][/tr][tr][td=1,1,82][font=仿宋_gb2312]极性[/font][font=仿宋_gb2312]
[/font]
[font=仿宋_gb2312]易溶于水[/font][font=仿宋_gb2312]
[/font]
[/td][td=1,1,261][font=仿宋_gb2312]用水稀释至有机物少于[/font][font=仿宋_gb2312][font=times]10%[/font][/font][font=仿宋_gb2312]，按照[/font][font=仿宋_gb2312]
[/font]
[font=仿宋_gb2312]水溶液分析物基质方案进行[/font][font=仿宋_gb2312]
[/font]
[/td][/tr][tr][td=1,1,82][font=仿宋_gb2312][font=times][/font]
[/font]
[font=仿宋_gb2312]中等极性[/font][font=仿宋_gb2312]
[/font]
[font=仿宋_gb2312]非极性[/font][font=仿宋_gb2312]
[/font]
[font=仿宋_gb2312]不溶于水[/font][font=仿宋_gb2312]
[/font]
[/td][td=1,1,261][font=仿宋_gb2312]试用正相或挥发至干，再将其溶于[/font][font=仿宋_gb2312]
[/font]
[font=仿宋_gb2312]水或一种水互溶性溶剂之中，然后用水[/font][font=仿宋_gb2312]
[/font]
[font=仿宋_gb2312]稀释至如上所述，按照水溶液分析物基[/font][font=仿宋_gb2312]
[/font]
[font=仿宋_gb2312]质方案进行。[/font][font=仿宋_gb2312]
[/font]
[/td][/tr][/table][font=仿宋_gb2312][font=times][/font]
[/font]
[font=仿宋_gb2312]选择固相萃取管或片：[/font][font=仿宋_gb2312]大小[/font][font=仿宋_gb2312]
[/font]
[table=100%][tr][td=1,1,236][align=center][b][font=仿宋_gb2312]样品量[/font][/b][b][font=仿宋_gb2312]
[/font][/b][/align][/td][td=1,1,107][align=center][b][font=仿宋_gb2312]萃取管规格[/font][/b][b][font=仿宋_gb2312]
[/font][/b][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,236][font=仿宋_gb2312][font=times]<1ml
[/font][/font]
[/td][td=1,1,107][align=center][font=仿宋_gb2312][font=times]1ml
[/font][/font][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,236][font=仿宋_gb2312][font=times]1ml[/font][/font][font=仿宋_gb2312]至[/font][font=仿宋_gb2312][font=times]250ml[/font][/font][font=仿宋_gb2312]，不要求萃取速度[/font][font=仿宋_gb2312]
[/font]
[/td][td=1,1,107][align=center][font=仿宋_gb2312][font=times]3ml
[/font][/font][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,236][font=仿宋_gb2312][font=times]1ml[/font][/font][font=仿宋_gb2312]至[/font][font=仿宋_gb2312][font=times]250ml[/font][/font][font=仿宋_gb2312]，要求萃取速度[/font][font=仿宋_gb2312]
[/font]
[/td][td=1,1,107][align=center][font=仿宋_gb2312][font=times]6ml
[/font][/font][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,236][font=仿宋_gb2312][font=times]10ml[/font][/font][font=仿宋_gb2312]至[/font][font=仿宋_gb2312][font=times]250ml[/font][/font][font=仿宋_gb2312]，要求高样品容量[/font][font=仿宋_gb2312]
[/font]
[/td][td=1,1,107][align=center][font=仿宋_gb2312][font=times]12[/font][/font][font=仿宋_gb2312]，[/font][font=仿宋_gb2312][font=times]20[/font][/font][font=仿宋_gb2312]，[/font][font=仿宋_gb2312][font=times]60 ml
[/font][/font][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,236][font=仿宋_gb2312][font=times]<1L[/font][/font][font=仿宋_gb2312]，萃取速度不重要[/font][font=仿宋_gb2312]
[/font]
[/td][td=1,1,107][align=center][font=仿宋_gb2312][font=times]12[/font][/font][font=仿宋_gb2312]，[/font][font=仿宋_gb2312][font=times]20[/font][/font][font=仿宋_gb2312]，[/font][font=仿宋_gb2312][font=times]60ml
[/font][/font][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,236][font=仿宋_gb2312][font=times]100ml[/font][/font][font=仿宋_gb2312]至[/font][font=times][font=仿宋_gb2312]1L[/font][font=仿宋_gb2312]
[/font][/font]
[/td][td=1,1,107][align=center][font=times][font=仿宋_gb2312]47mm[/font][font=仿宋_gb2312]
[/font][/font][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,236][font=仿宋_gb2312][font=times]>1L[/font][/font][font=仿宋_gb2312]，要求高样品容量[/font][font=仿宋_gb2312]
[/font]
[/td][td=1,1,107][align=center][font=times][font=仿宋_gb2312]90mm[/font][font=仿宋_gb2312]
[/font][/font][/align][/td][/tr][/table][font=仿宋_gb2312][font=times][/font]
[/font]
[font=仿宋_gb2312]选择固相萃取管或片：[/font][font=仿宋_gb2312]大管填料量[/font][font=仿宋_gb2312]
[/font]
[table=100%][tr][td=1,1,343][b][font=仿宋_gb2312]正[/font][/b][b][font=仿宋_gb2312][font=times] [/font][/font][/b][b][font=仿宋_gb2312]相、反[/font][/b][b][font=仿宋_gb2312][font=times] [/font][/font][/b][b][font=仿宋_gb2312]相、吸[/font][/b][b][font=仿宋_gb2312][font=times] [/font][/font][/b][b][font=仿宋_gb2312]附[/font][/b][font=仿宋_gb2312]
[/font]
[/td][/tr][tr][td=1,1,343][font=仿宋_gb2312]样品质量不超过填料质量的[/font][font=仿宋_gb2312][font=times]5%
[/font][/font]
[/td][/tr][tr][td=1,1,343][align=left][b][font=仿宋_gb2312]离子交换[/font][/b][font=仿宋_gb2312]
[/font][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,343][align=left][font=仿宋_gb2312]由离子交换容量确定[/font][font=仿宋_gb2312]
[/font][/align][align=left][font=仿宋_gb2312][font=times]1. LC-SAX[/font][/font][font=仿宋_gb2312]和[/font][font=仿宋_gb2312][font=times]LC-SCX[/font][/font][font=仿宋_gb2312]管：其吸附剂容量为[/font][font=仿宋_gb2312][font=times]0.2[/font][/font][font=仿宋_gb2312]毫当量[/font][font=仿宋_gb2312][font=times]/[/font][/font][font=仿宋_gb2312]克（[/font][font=仿宋_gb2312][font=times]1[/font][/font][font=仿宋_gb2312]毫当量[/font][font=仿宋_gb2312][font=times]=1[/font][/font][font=仿宋_gb2312]毫摩尔的[/font][font=仿宋_gb2312][font=times][+1][/font][/font][font=仿宋_gb2312]或[/font][font=仿宋_gb2312][font=times][-1][/font][/font][font=仿宋_gb2312]带电荷物质）。[/font][font=仿宋_gb2312]
[/font][/align][font=仿宋_gb2312][font=times]2. LC-NH2[/font][/font][font=仿宋_gb2312]和[/font][font=仿宋_gb2312][font=times]LC-WCX[/font][/font][font=仿宋_gb2312]管：离子交换容量由应用决定。[/font][font=仿宋_gb2312]
[/font]
[/td][/tr][/table][font=仿宋_gb2312][font=times][/font]
[/font]
[b][font=仿宋_gb2312]第二步[/font][/b][b][font=仿宋_gb2312][font=times] [/font][/font][/b][b][font=仿宋_gb2312]预处理萃取管或片[/font][/b][b][font=仿宋_gb2312]
[/font][/b]
[align=center][b][font=仿宋_gb2312]
[/font][/b][/align][font=times][size=3][/size]
[/font]
[size=3][font=仿宋_gb2312]在萃取样品之前，为了预处理固相萃取管填料，要用一满管溶剂冲洗管子。对萃取片则用[/font][font=times]5-10[/font][font=仿宋_gb2312]毫升。[/font][font=times]
[/font][/size]
[size=3][font=仿宋_gb2312]反相类型硅胶和非极性吸附剂介质，通常用水溶性有机溶剂，如甲醇，预处理，然后用水或缓冲溶液。甲醇湿润吸附剂表面和渗透键合烷基相，以允许水更有效地润湿硅胶表面。有时预处理溶剂在此之前使用甲醇。这些溶剂通常与洗脱剂一样是用于消除固相萃取管上的杂质及其对分析物的干扰，也可能该杂质只溶于强洗脱溶剂。[/font][font=仿宋_gb2312]
[/font][/size]
[size=3][font=仿宋_gb2312]正相类型固相萃取硅胶和极性吸附剂介质通常用样品所在的有机溶剂来预处理。[/font][font=times]
[/font][/size]
[size=3][font=仿宋_gb2312]离子交换填料将用于非极性有机溶剂中的样品，并用样品溶剂来预处理。对极性溶剂中的样品，用水溶性有机溶剂，再用具有适当[/font][font=times]pH[/font][font=仿宋_gb2312]值、适当含量和盐的浓度的有机溶剂的。[/font][font=times]
[/font][/size]
[size=3][font=仿宋_gb2312]为了使固相萃取填料从预处理到样品加入时都保持润湿，允许大约[/font][font=仿宋_gb2312][font=times]1ml[/font][/font][font=仿宋_gb2312]的预处理溶剂在管过滤片或萃取片表面上。如果样品是从一个贮液管或过滤管引入固相萃取管，则多加入[/font][font=仿宋_gb2312][font=times]0.5ml[/font][/font][font=仿宋_gb2312]最后的预处理液到[/font][font=仿宋_gb2312][font=times]1ml[/font][/font][font=仿宋_gb2312]的固相萃取管中、[/font][font=仿宋_gb2312][font=times]2ml[/font][/font][font=仿宋_gb2312]到[/font][font=仿宋_gb2312][font=times]3ml[/font][/font][font=仿宋_gb2312]管中、多加入[/font][font=仿宋_gb2312][font=times]4ml[/font][/font][font=仿宋_gb2312]到[/font][font=仿宋_gb2312][font=times]6ml[/font][/font][font=仿宋_gb2312]管中等等。这是为了保证在样品加入之前，填料管干了，重复预处理过程。在重新引入有机溶液之前，用水冲洗管中缓冲溶液的盐。如果适当，此时样品贮液管可以用一个接口装在管上。[/font][font=仿宋_gb2312]
[/font][/size]
[font=仿宋_gb2312][font=times][size=3][/size][/font]
[/font]
[size=3][b][font=仿宋_gb2312]第三步[/font][/b][b][font=仿宋_gb2312][font=times] [/font][/font][/b][b][font=仿宋_gb2312]加入样品[/font][/b][b][font=仿宋_gb2312]
[/font][/b][/size]
[align=center][b][font=仿宋_gb2312]
[/font][/b][/align][size=3][font=仿宋_gb2312]用移液管或微量吸液管准确地将样品转移到管或贮液管内，样品必需以适应固相萃取的形式存在。样品的总体积可以从１微升到数升（见步骤一），当过量体积的水溶液被萃取时，反相硅胶填料渐渐减少预处理时所获得的溶剂化层。这就会降低萃取效率和样品的回收率。对样品[/font][font=仿宋_gb2312][font=times]>250ml[/font][/font][font=仿宋_gb2312]，加入少量的水溶性溶剂（大约为[/font][font=仿宋_gb2312][font=times]100% [/font][/font][font=仿宋_gb2312]）以适当地保持反相填料的湿润性。对于每一个的应用和使用条件，样品的最大容量是特定的。如果回收率较低或重现性不好，可以按以下技术检测分析物的流失：用一个接口接两个有相同填料及预处理过的固相萃取管。让样品流过这两个管子，完成以后，分开这两个管子，分别洗脱。如果在下面管子的萃取物中发现分析物则样品体太大或填料太少，以导致分析物的流失。[/font][font=仿宋_gb2312]
[/font][/size]
[size=3][font=仿宋_gb2312]为使适当的化合物保留在填料上，洗脱或沉淀不要化合物，要调节[/font][font=仿宋_gb2312][font=times]pH[/font][/font][font=仿宋_gb2312]、盐的浓度和样品溶液在有机相中的含量。为了避免堵塞固相萃取管的过滤片或固相萃取片，如果可能，在萃取之前预先过滤或离心样品。[/font][font=仿宋_gb2312]
[/font][/size]
[size=3][font=仿宋_gb2312]用真空或正压，慢谩地让样品溶液通过萃取装置，流速会影响某些化台物的保留。一般来说，对于离子交换固相萃取管，流速小应大于[/font][font=仿宋_gb2312][font=times]2ml[/font][/font][font=仿宋_gb2312]／[/font][font=仿宋_gb2312][font=times]min[/font][/font][font=仿宋_gb2312]；对于其它上的固相萃取管，流速不应大于[/font][font=仿宋_gb2312][font=times]5ml[/font][/font][font=仿宋_gb2312]／[/font][font=仿宋_gb2312][font=times]min[/font][/font][font=仿宋_gb2312]；对于萃取片，大约为[/font][font=仿宋_gb2312][font=times]50ml[/font][/font][font=仿宋_gb2312]／[/font][font=仿宋_gb2312][font=times]min[/font][/font][font=仿宋_gb2312]。如果时间不是一个因素的话，滴速最佳。[/font][font=仿宋_gb2312]
[/font][/size]
[size=3][font=仿宋_gb2312]对于某些很难的样品基质，另外的前处理是必要的。见下页样品前处理介绍。[/font][font=仿宋_gb2312]
[/font][/size]
[font=仿宋_gb2312][font=times][size=3][/size][/font]
[/font]
[b][font=仿宋_gb2312]第四步[/font][/b][b][font=仿宋_gb2312][font=times] [/font][/font][/b][b][font=仿宋_gb2312]冲洗填料[/font][/b][b][font=仿宋_gb2312]
[/font][/b]
[align=center][b][font=仿宋_gb2312]
[/font][/b][/align][font=times][size=3][/size]
[/font]
[size=3][font=仿宋_gb2312]如果分析物被保留在填料上，使用与能溶解样品的相同溶液，或另外一种不能洗脱所要化合物的溶液，去冲洗掉不要的或不要保留的物质。通常所用冲洗溶液不超过一个管体积，对固相萃取片为[/font][font=times]5-10[/font][font=仿宋_gb2312][font=宋体] [/font][/font][font=times]ml[/font][font=仿宋_gb2312]。[/font][font=times]
[/font][/size]
[size=3][font=仿宋_gb2312]为消除不要的、可能保留很弱的物质，用比样品基质强，但其强度又不至于洗脱分析物的的溶剂去冲洗填料。典型的溶液可含有比最后洗液少一点的有机或无机盐，也可以调节不同的[/font][font=times]pH[/font][font=仿宋_gb2312]。与最后洗脱液完全不同极性的纯溶剂或溶剂混合物可为有用的洗脱液（见表[/font][font=times]A[/font][font=仿宋_gb2312]）。[/font][font=times]
[/font][/size]
[size=3][font=仿宋_gb2312]如果选用分析物不被保留在填料上的方案，则应用相当于一管体积的样品溶剂去洗脱管上的任何残余、分析物或[/font][font=times]5-10[/font][font=仿宋_gb2312][font=宋体] [/font][/font][font=times]ml[/font][font=仿宋_gb2312]去洗脱萃取片上的这些物质。在这种情况下，冲洗是作为洗脱来完成萃取过程。[/font][font=times]
[/font][/size]
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