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分享大家在检验分析中的小经验与小技巧！无论什么内容，只要与检验相关就行，分享有奖励哟！奖励别找我要，找这个版的版主。哈哈。 我先来抛砖引玉,前几天在微生物分析验证中,我碰到了一个样品,菌落计数验证通过了,而大肠埃希菌的阳性却未通过.我就采用过滤法,过滤10ml溶液(相当于1g样品),然后把滤膜放入BL中培养,验证就通过了. 采用蒽酮检测葡萄糖的含量，与所用的试剂蒽酮有关系，蒽酮应该避光保存，并且它是显色反应，与蒽酮反应后应该是绿色，应该同是做空白试验，检测的吸收度应该扣除空白，空白应该是黄色，若显色不对则应该重新，并排除是否所用器具或试剂受污染。 1、 检验吲哒帕胺片的含量测定时，采用超声波超声可使片剂更易分散，主成分溶解完全，没有浪费，与研磨转移方法比较，对含量均匀度测定没有影响，且简单方便且更合理。
2、乙醇溶解主成分后，不能溶解辅料，需要过滤。采用离心方法使辅料沉淀，取上清夜。（注意，有很多离心管不具塞子，可用柔软的塑料薄膜袋扎橡皮筋做塞子。没有塞子离心，偏差可达5％），与薄膜过滤法比较，对测定结果没有影响。而且，如果过滤法操作不够快速，乙醇挥发，易影响测定结果。 在做微生物限度检查的验证所加菌液不一定要是1ml，只要把菌液的菌数控制在50~100之间就可以了，因为好多时候1ml不是太多就是太少了。以下是我做验证时的加菌液的浓度： 金葡10-6 0.4ml 大肠10-6 0.3ml 枯草10-6 0.3ml 白念10-5 0.2ml 黑曲霉10-4 0.3ml 在做中药材的浸出物的检测时，一定要按标准控制好溶剂的浓度（如乙醇等），否则检验结果会差异很大。 当液相鉴别中供试品与对照品出峰时间不一致，无法判断是否合格时，可用对照品与供试品各半配成混合溶液后进样，若峰宽未变宽，未出现驼峰，即可判断为合格 做原料残留物检测的时候，如果主药对杂质有干扰，现有方法无法检出，需要自己建方法的话，要优先考虑利用理化性质将杂质分离出来再进行测定。往往有意想不到的效果。 在药材薄层色谱鉴别时应该考虑一下展开剂的温度与配制顺序，有时会影响色谱的结果 做药品有机溶剂残留量检查时,可以不拘泥于规定的色谱柱, 通常的DB-624可以满足要求, 取样量也可以灵活调整, 标准溶液浓度根据限度做相应调整就可以了. 测多糖类物质时，把供试品先超声2小时，加入浓硫酸时垂直滴加再混匀，就样的测定结果重现性高，但必须在两小时内测定。 引用：“在做微生物限度检查的验证所加菌液不一定要是1ml，只要把菌液的菌数控制在50~100 之间就可以了，因为好多时候1ml不是太多就是太少了。以下是我做验证时的加菌液的浓度： 金葡10-6 大肠10-6 枯草10-6 0.3ml 白念10-5 0.2ml 黑曲霉10-4 0.3ml”
实验中0.3ml ，0.4ml 操作起来组间误差可能会大些，我更惯用接近1ml，比如 枯草10-6 0.3ml ，我会选择10-5 0.5ml 吸到10-6，计数时再用 0.7ml 薄层色谱鉴别时饱和时间一定要够 在采用HPLC法测物质含量时，如若流动相中用了缓冲盐，一定要注意其pH值，放置过程中可能会产生变化，而某些药物对这种变化很敏感。 用HPLC法测物质含量时，温度的控制极其重要，最好用有柱温箱的，如果没有就要装空调保持恒温后再测定，否则会出现基线飘移，结果不准确。 有些品种温度的影响非常大,我遇到一个品种.对照品溶液不能放在冰箱中,放在液相室内还开着空调,第二天才能做,否则第二天的对照品到中午也不能用. 在无菌室中进行供试液接种时，以前使用一次性无菌注射器直接接种时未采用针头，在摇匀培养基时厌氧区有游历氧进入的概率，现将以前废弃的针头用上，进入液面接种易混匀且入氧的概率降低。 下面是引用changkaidong于06-12-14 15:42发表的:
在无菌室中进行供试液接种时，以前使用一次性无菌注射器直接接种时未采用针头，在摇匀培养基时厌氧区有游历氧进入的概率，现将以前废弃的针头用上，进入液面接种易混匀且入氧的概率降低。
会被污染吗？ 1.细菌内毒素定量检测中,鲎试剂开瓶后,要在半小时内完成实验,否则鲎试剂活度会降低,导致后面反应管的平行性差.
2.在使用微量移液枪时,要注意"重压轻打",加液会更家准确. 我觉得在微生物方法学验证时做培养基稀释法时每个碟子总加菌量还是1ml比较好,要不菌液组的菌数可能会存在误差! 在做一些乳膏的含量测定时，往往会使用提取分液，在分液时如两相的分界不清，可加少量的饱和氯化钠。分层处会比较明显。 1 用HPLC法测物质含量时，样品最好用流动相溶解，否则容易产生干扰峰，影响结果，特别有可能出现倒峰，一定要注意。
2 使用含有缓冲盐的流动相，容易堵塞管路和柱子，甚至检测器，如果检测器堵了，最好先不要拆，使用10%甲醇水超声加热一下作为流动相，慢慢小流量冲洗。效果很明显。 在温度低的环境下做一些中药制剂的萃取时，往往会出现乳化现象，即两相不容易分层，这时可加入少量的饱和氯化钠溶液或者用电吹风对分液漏斗加温或用热抹布敷，可以加速其分层。 非水滴定中，试剂的含水量对结果有较大影响，如更换不同厂家的冰醋酸，试验结果会出现不同结果。 中药制剂的溶液（比较稠或量少）要用滤纸过滤时，可以先通过离心的方法使之分层，再去过滤。这样可以加快过滤，减少有机溶剂的挥发（环境温度高时）。 用高效液相色谱仪检测人参、麻黄的含量时因检测波长为边缘波长（203、207nm）往往一次不能成功，特别是使用一段时间后的检测器。可卸掉色谱柱，直接连接检测器，用0.1%的盐酸清洗检测池4小时，效果会好些。 用高效液相色谱仪测定含量时，用色谱纯试剂处理对照品和样品，可减少误差。 HPLC检测中，梯度条件容易产生干扰峰，可尝试通过以下几种方法规避：
1：使用重蒸后的水或用市售的纯净水（乐百氏的比较好）
2：尽量选用高波长下检测
3：梯度程序尽量平缓
4：样品浓度选用线性范围内的最高点 我是专门做检验方法建立的专职人员,对检验方法特别是化学检验方法的建立有着特别的体会: 当然,我所指的主要是化学原料药中所用的原辅料,中间体的分析方法的建立,我的个体会是,分析方法主要来源于产品的理化性,只要下功夫读懂产品的理化性质,发现其化学性质,特别是将有特殊现像的化学性质一一列出,再给根据某基团的性质,做特别的有真对性的初步试验(不定量,只做定),发现可行,再做被步的定量反应,如果可行,按照分析方法的建立指南做定一步试验即可. 在作澄明度检查、可见异物或者不溶性微粒检查时，不可以用超声波助溶的，否则有些东西就被分解了，什么也查不到，和粉末药品的工艺有关。
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