请问噬菌体筛选肽库,需要些什么仪器?
请问噬菌体筛选肽库,需要些什么仪器?有没有具体点的介绍呢。希望大家帮助啊!!
[[i] 本帖最后由 ted_sun 于 2008-7-27 21:33 编辑 [/i]] M13噬菌体单链DNA提取试剂盒
抗M13噬菌体mAb、CM Sepharose FF
BCA蛋白定量试剂
1 材料与方法
1.1 IL-6单抗 具有中和IL-6生物活性的单抗C220由本室自行研制[1] 。
1.2 随机6肽文库 呈现于丝状噬菌体P3 蛋白的随机6肽文库由姚志建教授惠赠。
1.3 随机6肽文库的亲和筛选[2] 噬菌体经扩增筛选,尽可能将与IL-6单抗特异结合的噬菌体富集。
1.4 测序 将亲和筛选所得噬菌体进行扩增和制备测序模板[2],应用PE公司全自动DNA测序仪测序。
1.5 竞争结合实验[3] 按ELISA常规方法将IL-6单抗包被于96孔板,随后加入与IL-6预先保温的不同滴度的噬菌体克隆,在与单抗结合1 h 后,顺序加入噬菌体抗体、酶标二抗和酶反应底物。
1.6 Western 印迹分析 噬菌体颗粒经SDS-PAGE 分离并转至硝酸纤维膜,随后依次与IL-6单抗C220酶标二抗及显色底物反应, 至信号出现。 [url]http://www.fx120.net/yxlw/jcyx/myx/200607191042044909.htm[/url]
[url]http://www.shouxi.net/journal/articleinfo.aspx?art_id=147612[/url]
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