急急急急:请问小鼠眼眶后静脉丛取血,怎样防止溶血?
请问大家:我在做药理实验时,要做小鼠眼眶后静脉丛取血,请问在取血过程中,有什么要注意的吗?
我用的是熔点管(小玻璃管),取出后,用酒精灯把熔点管的两端封住,然后,在离心机上离心(3000rpm,15min),分离血清,可是,离心的血清样本,有的很差,有的很好,现在还没找个合适的方法,也没有加抗凝的和促凝剂的药品,请问原因?谢谢! 药代实验时需要给大鼠取血。取血方法可以采用眼底静脉丛取血。有些新手取血时会出现比较严重的溶血现象。如何避免这种现象的发生呢?一般来说,采用眼底静脉丛取血,只要找的位置正确,血液能够迅速流出,是不会溶血的。因此如果出现溶血,就要具体分析各种因素。
溶血大致由以下几方面因素造成:
a 强烈振荡(包括真空管采血时,抽血针内径太细而导致红细胞破裂)
b 加入渗透压低于0.9%生理盐水的溶液导致红细胞破裂
c 将全血冷冻导致红细胞破裂
溶血对试验的影响取决于检测的具体药物是什么,药物具备什么特性?对大多数药物来说,血浆浓度与红细胞内浓度成正比,检测全血浓度与血浆浓度意义相当。有些药物在其他血细胞如白细胞中居多(如阿的平在白细胞中富集,白细胞多则其浓度高,其全血浓度仅仅反映了白细胞的浓度),所以检测时主要检测血浆浓度。但对于富集于红细胞中的药物(如免疫抑制剂,雷帕霉素或氯噻酮),由于各人红细胞占全血比例不一,所以反而要求测定全血浓度。
由以上看来,如果药物并不富集于细胞中,则溶血对于浓度测定影响不大,如果有特殊情况,则需要注意。因此,如果发生溶血,在实验中应注意记录溶血的时间点,在最终检测结果出来后再判断是否舍弃本次实验结果。 谢谢鸭绿江版主给我的答复.我还有一个问题请教:
你好,我这次实验用的是STZ (ip,180mg/kg)诱导糖尿病小鼠(体重在28 g左右),这个剂量我在文献里查过的,是合适的,而且我STZ注射液也是临时配制的。可是造模72h后的小鼠空腹血糖值跟正常的差不多,也就是造模不成功,但小鼠的体重均有小幅度降低,其他糖尿病病症都没有,现在搞的我好急,我是第一次做药理实验,请指教?谢谢您先前对我所提问题的回复。
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