鸭绿江学术资源论坛 » 【药物化学】 » 多糖分子量测定 求助

nana82269 发表于 2007-12-12 21:44

多糖分子量测定 求助

各位前辈：

  你们好，我现在在用HPLC法测定多糖分子量，但是各种分子量的标准多糖的出峰时间都一样，不明白是什么原因？各位前辈可遇到过这种情况？本人很着急，请各位老师指点一二！
           
                     着急的小鱼
                     07.12.12

sd0930 发表于 2007-12-13 10:12

多糖分子量测定需要采用凝胶色谱柱，一般不能采用普通的反相柱，否则根本就分不开

nana82269 发表于 2007-12-13 10:44

我用了凝胶柱，是TSK柱，示差检测器！
可是为什么会出峰时间一样呢？

          着急的小鱼

cowboycoxx 发表于 2007-12-13 15:12

用GPC吧.应该分的开

gcliao 发表于 2007-12-30 21:52

关于多糖含量测定，业内有两种评价方法。一种是狭义上严格的多糖测定，即水提取多糖后，以凝胶色谱柱分离、洗脱提纯粗多糖得到较单一分子量的多糖，再水解成各种单糖，以HPLC法分离测定各单糖，即可得到比较严格意义上的多糖含量及其组成。这种方法是科研级的多糖测定。
另一种评价方法一般是生产企业用于质控的多糖测定：一般过程是水提醇沉粗多糖后，以葡萄糖作为相比较的物质，加入特定显色剂后比色测定粗多糖的含量。注意，这种方法测得的是以葡萄糖作为折算的多糖含量。但这种评价方法简单实用，能反映一定的质量指标，作为质控之用可以的了。包括中国药典和一些国标、行标都采用此方法评价多糖含量，方法大同小异，如硫酸-苯酚法，硫酸-蒽酮法。但根据不少实际检验人的反映，要想检测结果有很好的重现性，还是有很多细节问题要注意的。

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