【讨论】做核磁是到底加多少样品合适？
平时我报原料药做结构确证时经常碰到要做氢谱、碳谱、DEPT，H—H，C－H等谱图，各种样品所加的量相同吗，不同各种谱图大概加多少？ 大家配样品时要注意以下几点：1、样品量的问题：一般对于H NMR来说需要的量比较小，大概几个毫摩尔就可以了，对于二维谱和碳谱浓度就要比较大，最好有几十个毫摩尔。2、溶剂量的问题：一般样品的溶剂量应该在0.5ML，大概在核磁管中的长度为4CM左右。溶剂量太小了会影响匀场，进而影响实验的速度，和谱图的效果；溶剂量太大了嘛，那 就太浪费了。3、溶剂选择的问题：选择的原则是：样品易溶解，溶剂峰和样品峰没有重叠，粘度低，并且价格便宜。大家在选择的时候主要是样品的溶解性问题。4、核磁管的问题：首先尽量选用优质核磁管，还有就是最好不要在核磁管上乱贴标签， 这会导致核磁管轴向的不均衡，在样品旋转的时候影响分辨率，还有可能打碎核磁管造成重大损失。 另外,我觉得做核磁时样品溶液的浓度大小也是非常关键的,1,你可以考虑用加内标的方法，加入一个对你样品没有干扰的样品（样品的H位移最好与加入物不同），然后通过计算H计算样品浓度。
2,太稀的话好像是有毛刺的，有些出的峰看不到
假如是问多少浓度的样品做出的核磁图谱最好，那么就是分子量大的加多一些，因为信号出来的时候不是根据质量的，而是根据摩尔浓度的。一般来说，分子量在200左右的，10~20mg做氢谱就比较好了。浓度太大做氢谱匀场不会太好，那么有些精细的耦合裂分就表现不出来，而且由于增益太小，图谱质量很差的。
要是做碳谱，13C对磁场的均匀度要求不高，在样品量足够的情况下，尽量增加吧，因为样品量越大，需要时间越短。另外信噪比也好。一些信号弱的季碳、连氮的由于14N而加宽的13C信号及连氟的碳由于裂分而使信号弱的碳出峰会很好的。
而你如果是要想定量，那么就需要加入标准物品了，找一个在样品用的试剂中溶解行好的标准品，保证两个不反应，还需要样品和标准品至少各有一各峰完全分开，不叠加在一起，就可以用标准品的峰面积和样品峰面积比较，据此来求出样品的浓度。需要注意的是驰豫时间要选择足够长，使样品和标准品都充分驰豫。 学学习，好资料！！！ [quote]原帖由 [i]chenwei6669[/i] 于 2007-12-31 17:35 发表 [url=http://forum.e2002.com/redirect.php?goto=findpost&pid=1067821&ptid=212457][img]http://forum.e2002.com/images/common/back.gif[/img][/url]
另外,我觉得做核磁时样品溶液的浓度大小也是非常关键的,
1,你可以考虑用加内标的方法，加入一个对你样品没有干扰的样品（样品的H位移最好与加入物不同），然后通过计算H计算样品浓度。
2,太稀的话好像是有毛刺的， ... [/quote]
H谱要10-20mg，有没有搞错，一般样品5mg已经足够了，C谱的话如果样品充足50mg也可以啦 [quote]原帖由 [i]shen3511[/i] 于 2008-4-17 22:03 发表 [url=http://forum.e2002.com/redirect.php?goto=findpost&pid=1343406&ptid=212457][img]http://forum.e2002.com/images/common/back.gif[/img][/url]
H谱要10-20mg，有没有搞错，一般样品5mg已经足够了，C谱的话如果样品充足50mg也可以啦 [/quote]
赞成兄弟的观点 [biggrin] 我们做时是加10－20mg，所有的谱（1DNMR, 2DNMR)都一起做了。 如果作氢谱，碳谱等一系列谱最好样品多点大于5mg就差不多了，因为样品量越多累加次数越少，耗时越短，有时因核磁管不干净或带入杂质，而所加样品较少，样品的纯度就不够，干扰就较大，样品的量大的花，上述影响就较小，好像还更做谱人的技术以及核磁的兆数有关。而氢谱，技术好的花1到2mg都能做出，我的一个师兄，分到一个新化合物只有0.82mg,1D和2D谱都做了，不过做谱时间花了好几天
页:
[1]
