微生物肝素酶研究进展
酶的分离纯化是酶学研究的重要部分,也进行深入研究的先决条件。
早期使用磷酸纤维素柱色谱和羟基磷灰石柱色
谱,纯化效果不佳。Yang等先用羟基磷灰石进
行吸附和洗脱,除去约70%的杂蛋白,再用QAE
葡聚糖进行柱色谱分离,吸附除去剩余杂蛋白,使
1纯度提高3~4倍:然后经等电聚焦和凝胶过滤,
制得较多量的纯
Lohse等用羟基磷灰石和QAE葡聚糖凝胶吸附法进行粗分离,再用羟基磷灰石HPLC精分离
得到3个活性峰。将此3个峰再分别用阳离子交换
色谱Mono S FPLC纯化,以凝胶渗透色谱(GPC)一
HPLC定性分离,最终获得3种1,纯度提高3000~
5000倍,活性回收率1.02%~10.8%。
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