标准曲线问题.
HPLC测葡萄糖.做标准曲线:配了三个标液: 4g/L, 12g/L, 40g/L. ( x )HPLC对应的三个样品其面积为: 706614, 1947172, 5915346 ( y )
excel做出标准曲线为: y = 3E+06x - 2E+06
(姑且不说R2值的问题,即使R2为3个9也有同样的问题),问题是: 若把刚使用过的面积如706614带回标曲,得到的也只是约1g/L,而真实值应该为4g/L,差的特别多,为什么?
[[i] 本帖最后由 adobe112 于 2008-3-24 12:27 编辑 [/i]] 个人认为应当存在如下原因:
1.你采用的色谱条件可能存在问题,因为本身有一个系统试用性问题.
2.即使你采用的色谱条件客观上适合,还有你的柱子柱效咋样啊,蜂面积结果可靠吗,最底检测限或样品浓度是否配的合适,可能你配的样品浓度已经偏离了线性.
3.线性回归和你采用的色谱条件是相辅相成的,二者有一定的内在联系.
4.此外,操作者的操作水平也会影响实验结果,譬如,称样结果准确性,配样操作的合理性等. 多做几个浓度吧，才三个点，有点少 同意楼上的观点，三个点是少了点，除了点，还应该考虑范围 其实从你这个标准曲线的结果来看，这条曲线根本就不合格，怎么说呢，Y=aX+b，在你的曲线中 a 与 b 在同一个数量级，在这种情况下，用一点法计算是没办法还原的，建议你增加几个点，同时要尽可能的找小浓度的点，越接近0点越好，也就是说你做的曲线 b 值应该尽可能的小才好！！[biggrin] 我同意2楼是看法,3楼的也很有道理! 的确你的标线不合理，首先选点至少要5个吧，其次，你的三点的浓度4g/L, 12g/L, 40g/L. 我看连最小的都不在仪器检测的准确范围，要知道样品所配的浓度吸收度在0.2-0.7范围才能保障你的检测结果的准确呀！
其它可能的原因我就不再说了
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