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olay 发表于 2008-5-9 17:03

关于测活性的问题

对一个靶点测活性，遇到了NMR方法测kd值，请问什么是kd值？这种方法在测酶活时常用吗？

aspect 发表于 2008-5-16 08:29

RNA分子与金属离子间的相互作用在生物学中占有非常重要的角色，但之间的作用力较弱，用19F-NMR方法可估算出之间的离解常数。例如：用5-FU标定TAR、RNA溶液,分别用Mg2+、Ca2+滴定FU-23、FU-25、和FU-40，得到19F化学位移的差值，这差值很小，可绘出不同离子、不同浓度条件下的曲线（Δδ-[离子]/[TAR、RNA]），通过非线性拟合便可得出离解常数Kd值，其值分别为0.9±0.6mM、2.7±1.7mM，离解能力Mg2+>Ca2+.在用Pb2+诱导TAR、RNA离解实验中，对磷酸二酯酶C24-U25有强烈的离解作用，但是二价和三价离子可阻止这种作用，其离解能力排序为Co(NH3)63+> Mg2+ > Ca2+[13]。
Mikoøaj Olejniczak, Zofia Gdaniec, Artur Fischer, Tomasz Grabarkiewicz, èukasz Bielecki, Ryszard W. Adamiak. The bulge region of HIV-1 TAR RNA binds metal ions in solution[J]. Nucleic Acids Research, 2002, 30 (19): 4241-4249

olay 发表于 2008-5-20 20:24

知道了很多，谢谢啦!

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