常见造成PCR结果假阴性的缘因有以下几点
常见造成PCR结果假阴性的缘因有以下几点：（1） 引物设计是否合理，有无二级结构形成，尤其是引物的3`端应无发夹结构
（2） 标本中是否有Tap酶抑制剂，Tap酶是否失活。
（3） 反应体系中有无蛋白酶或核酸酶降解DNA聚合酶或模板DNA，可在95℃以上加热10min使其灭活。
（4） 反应体系中是否有较难去除的蛋白质抑制PCR系统，用蛋白酶K重新处理常得到较优理想的结果。
（5） 循环温度，特别是解链温度是否准确，退火温度是否过高。有些PCR仪器指示温度与实际 温度不符，过高则酶在前几个循环中迅速失活，过低则模板变性不彻底。
（6） PCR产物的方法灵敏度不够，如琼脂糖凝胶电泳法敏感性较低。
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