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【免疫与微生物区有奖活动之二】向大家推荐你实验室用的试剂或试剂盒(参加就有奖

本主题由 漂浮导管 于 2008-7-14 08:49 设置高亮
我做凋亡比较多,常用到:
1,AnnexinV-PI试剂盒!
比较起来,BD的用起来效果相当不错,荧光强度合适,图比较漂亮。jingmei的价格没有优势,特点是浓度较大,可以加3~4ul/管,相当于降低了成本。
2,calcein AM 检测线粒体通透性,简单,检测方便,灵敏度稍微差一点。不要认为阴性表达就是凋亡细胞呀!!千万注意!
[glow=255,red,6]>>快乐应助<<[/glow]

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我们实验室用的试剂盒有:
生工生物工程(上海)有限公司的UN1Q-10 柱式通用DNA纯化试剂盒.
Promega 的genomic DNA Purification 试剂盒
High Pure Viral RNA Kit
总体效果不错.价格还可以.

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DNA,RNAMaker 个人认为TAKARA和天为时代的就可以,两个价格稍有差别,但是都可以;
PCR还是TAKARA 比较保险,价格高;有时候也用Sangon,tiangen的;
免疫试剂盒:中山金桥;
ELISA酶联免疫试剂盒: 上海太阳 GBI的;
RNAi技术相关的制品 AMBION;
质粒提取:Promega的,比较稳定,很好用,也熟练了;
DNA回收的,鼎国的就可以,而且一直用的,没有什么问题,还便宜。

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我们主要是做免疫的,ELISA酶联免疫试剂盒: 上海太阳的比较便宜,支持国产就多用;肿瘤标记物SYSMEX的试剂稳定可靠,但价格较贵;晶美的酶免试剂也比较好,但价格相对较贵;如果折衷的话就选进口分装的试剂盒,价格适中,稳定性也可以。另外,做酶免,就像楼上所说:“一抗最好用进口的”。

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我来说说我们实验室用过的一些试剂、试剂盒  呵呵

1、抗体类
最好的属于Sigma的了,用了都说好:)就是贵,我用过其eNOS单抗,非常好;背景低,特异性也好。6000多。。
其次属于一大批国外公司了,我们实验室用过的有Santa cruz/Abcam/Alexixy/BioAnti/Phoenix,质量大部分可靠。但是大家要注意以下Santa cruz的东西,这个公司号称最全的抗体公司,可其抗体质量不稳定,有人用着很好,有人就不行。但保存方便,不是-20度冻存,而是4度。
国内的一抗没用过,只用过内参一抗。GAPDH、Toblin、a或b-Actin都可以,我们一般用上海康成的,质量极好,一支过氧化物酶偶联的GAPDH卖1400。呵呵,若想目的蛋白和内参显影在一张片子上,这是不二之选。
二抗比较简单,也便宜。进口的一般也就200多,上海中杉的东西我们用过,不咋地,黑乎乎一片。不推荐,它的一抗嘛,普通的还可以,稍微新一点的蛋白没人敢买。

另外,发光一般用Santa cruz的增强型ECL试剂盒,不贵,几百块,非常好用
2、Elisa类(包括EIA,放免啦)
一般用国产的,北京军科院的。复杂、少见一点的蛋白,就要选择代理了。我们还是一般用上海精美的东西,大公司信誉还是好一点。上海优维宁的Elisa试剂盒也不错,全。

3、质粒提取
Promega、Tiangen、鼎国、上海博成等等都用过。后面几个国产都差不太多,随便选,哪个送货快选哪个

4、Real-time,一般用Bio-rad的原装试剂盒

5、2-D  Amersam和GE的EttanTM DIGE
[fly]流水下滩非有意,白云出岫本无心[/fly]

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TAKARA PMD18-T :T克隆用载体
TAKARA hot-PCR taq:热启动PCR酶

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我做凋亡蛋白质组学,主要用到以下试剂(效果蛮好的):
1.TUNEL kit (fluorescein, in situ cell death detection kit; Roche),主要检测DNA的原位断裂情况
2. Anti-cyt c antibody (7H8.2C12, Pharmingen).用于检测细胞色素c的释放
3. Fluo-3/AM (sigma),检测胞质内钙离子的变化
4. 2-D Quantant kit  (Amersam),用于水化后蛋白质的精确定量.

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大家好,我们实验室用的仪器,试剂如下:(希望对大家有用)
1.我们做单抗成功率特高,除了技术外,还有就是试剂.我们用的饲养细胞是南京农业大学的,效果特好!BALB/C小鼠是重庆医科大学实验动物中心的,他们专门培养,很好用.SP2/0小鼠骨髓瘤细胞系由南京农业大学提供。融合前用8-鸟嘌呤处理以除去反祖突变的细胞,使SP2/0细胞大小均一,活力增强。
2.二氧化碳培养箱:美国Forma公司的,二氧化碳培养箱:美国Forma公司的,都是用了好多年,质量较好!
倒置显微镜:日本Olympus公司的,数码相机:日本Olympus公司的,虽说是日货,但为了实验,还是将就吧!
大容量离心机:上海安享科学仪器厂;恒温水浴锅:上海仪表集团供销公司;超低温冰箱:美国Forma公司;酶标仪:美国BIO-RAD公司;酶标板:美国COSTAR公司;细胞培养板:美国COSTAR公司;加样枪:Eppendorf公司
3.这是我们所用的试剂,经实践证明确实不错!
小牛血清:华东理工大学;二甲基亚砜(DMSO):SIGMA;标准猪肌浆球蛋白抗原:Sigma;羊抗鼠辣根过氧化物酶标IgG:北京鼎国公司;邻笨二氨(OPD):上海白鹤化工厂产品;PEG-1500:Roche;双抗:GIBCO;HT培养基:SIGMA;HAT选择培养基:GIBCO;DMEM培养基:GIBCO;
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工具酶 Maker等 考虑到产品质量与试验经费问题,我们选择的工具酶多为TAKARA,虽然本人不太喜欢日本(纯粹个人观点),但国产的质量实在不敢相信,只好退而求其次!希望不久的将来可以放心使用国货!

RNA提取,我觉得如果不用试剂盒(太贵,条件所限),个人觉得国产的TRIZOL就OK,上海生工的质量还行!
扩增时使用一步法试剂盒多用TAKARA,可以节约好多时间,同时当扩不出时,保证不时试剂的问题,容易分析原因!

如果觉得太贵,呵呵,我们有个方法可以考虑!试剂盒里的东西可以多用一倍的数量,算起来就经济许多!就是把50的体系做成25 或者更小的体系,这样就可以多用一倍或3倍了!

当然如果经费充足,建议选用老外的,毕竟质量可以绝对保证!

重要的试验步骤建议选用进口试剂,毕竟时间是无价的!

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有关PCR纯化、DNA割胶回收、提取质粒试剂盒,我们实验室试过很多公司的,认为还是V-gene公司(维特洁)特别好。
工具酶:英国biolabs
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有人做过 环境样品的总DNA提取吗?我向大家建议一个试剂盒,美国产品,国内好像还没有代理,不过可以邮购,或者同国朋友买。MO BIO 公司的 PowerMax Soil DNA Isolation Kit。

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RT-PCR中用到的试剂盒 提组织RNA老外的推荐使用Invitrogen 的TRIZOL LS REAGENT,后来用国内的,本人感觉生工的和不TAKARA效果还可以。
PCR可用 Qiagen的 PCR 试剂盒。 DNA marker和 限制性内切酶用Promega的就比较好,经费紧张推荐使用TAKARA的,质量比较稳定。

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蛋白纯化系统建议使用NOVAGEN或QIAGEN的,呵呵
表达系统可使用PET或KG

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我们使用的是时间分辨免疫荧光试剂盒,如乙肝五项、肿瘤的AFP、CEA,以及甲功五项,性激素六项等等,
感觉是比酶免试剂盒灵敏度要高,定量也比较准确,只是现在国内的仪器有点不行,上全自动比较困难,只有
PE公司的有全自动仪器,而且比较娇贵,容易出问题,而且样本量也有一定的限制,如一些大医院就不够做。
现在国内的商家有上海新波、广州达瑞抗体公司,新波的在乙肝五项的试剂盒做得不错,而达瑞的则是肿瘤的
做得不错。

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呵呵,顶一下,凑个热闹,斑竹加威望呀
我们实验室的工具酶一般都是NEB或是Takara的,感觉效果都还不错,挺好用的,
southern blot 的检测以及探针标记试剂盒用的是CDP-Star效果也很好,
DNA 胶片段回收试剂盒是鼎国的,
我们还有人用过吉凯的RNAi试剂盒也很好用,
天涯苍苍日茫茫,风色萧萧海清凉!潮涨潮落何为是,待到功成再张扬!

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