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【经验交流】脂质体的制备及电镜的应用

【经验交流】脂质体的制备及电镜的应用

一、脂质体的结构及分类


1 多层脂质体MLVs
   MLVs是双层脂质膜与水交替形成葱皮样结构的囊泡,一般由五层或更多层同心板组成。最主要
的缺点是:包封容量相对低,MLVs大小从100nm到1μm。
2 小单层脂质体SUVs
   SUVs是小的均匀囊泡,最小直径20nm左右。根据脂
质浓度,其包封率为0.1%—1%。
3 大单层脂质体路LUVs
   LUVs直径大于100nm,介于SUVs与MLUs之间。LUVs与MLUs比较,对水溶性药物包封率高。
二、制备方法
1 机械分散法,2 钙融合法, 3 有机溶剂分散法,4 反相蒸发法,5 去污剂分散法,
6 气泡方法,7 超声制备法等。

例:超声制备空白脂质体
  干燥脂质
1.将HSPC/Chol(75/25)溶于氯仿/甲醇有机溶剂混合液中(2:1 v/v)
2.将脂质溶液移到圆底瓶中, 在(T>Tc)恒温水浴中旋转蒸发除去有机溶剂
3.继续上述步骤直至干燥脂质膜沉积在瓶壁上, 脂质沉积瓶壁后继续抽吸15min
4.将氮气通入旋转蒸发器至瓶内外无压力差后, 从旋转蒸发器上取下容器
5.真空干燥
  水化脂质
6.解除真空后,在瓶中注满氮气,加入PBS缓冲溶液(pH=8.0)(PBS缓冲溶液应预先充人氮气或在真空下去除氧气)
7.振荡器上快速混匀, 冰水浴中超声10-30min(通氮气)
8.使悬液在T>Tc下放置2h, 以完成封闭过程
9.在T>Tc下过聚碳酸酯滤膜(0.4, 0.2, 0.1μm)各三次
10.用激光粒度分析仪检测粒径大小及分布, 用透射电镜观察并拍片记录




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