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FoxP3基因

FoxP3基因

  兄弟的课题正涉及到FoxP3基因,有不少感想,也有不少困惑,希望和兄弟们交流。CD4+CD25-T在外周抗原的刺激下变成 CD4+CD25+T需要 FoxP3其作用吗?或者反过来说,此基因表达的结果是这种转变马?
转自丁香园
CD4+CD25-T在外周抗原的刺激活化后就会表达CD25,作为IL2的受体,和FoxP3没什么关系,也不是Treg,当然有其他的情况,在某些细胞因子,比如IFNgamma,TGF-beta等的存在下,外周的CD4+CD25-T cell可以转化成 CD4+CD25+Treg,伴随着Foxp3的上调。

呵呵, 发表一点自己的看法,如果不对, 还请各位指点.
T细胞活化后表达CD25(IL-2受体), 是其活化形式之一. 但体内在稳态下也存在CD4+CD25+细胞, 这就是目前比较hot 的Treg.
研究T调节,首先要先排除活化T细胞的影响, 比如使用4色Flow.
至于Foxp3表达, 其实只是后者的基因array综合分析结果. 到底和Treg的双向调节功能是否就一定存在线性关系, 我认为不能过早下结论. 以Foxp3作为窗口研究T调节细胞功能,是否一定就能得到一个令人信服的结果?

呵呵, 提点自己的想法, 还望各位兄台指正.
1.实验前标记CD25单抗, 作为后续分析中Treg的一个指标;
2.实验后再次标记CD25单抗, 注意要用激发波长不同的颜色(克隆号相同, 并且flow的compensation 相同, 以期在Flow中能明显区别), 排除实验中活化的T细胞;
3.这样, 在实验中才能比较明确得发现原本存在的Treg的变化趋势. 如果想sorting 该群细胞进行Foxp3的real-time PCR分析, 也比较可靠.
4.另外, BD Pharmagin最近新出了Foxp3 的单抗, 刚用过, 效果还可以, flow上比较好调节, 不需要太强的Compensation , 有兴趣可以试一下.

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我也说上两句:
转录因子foxp3是CD4+CD25+ Treg的特异性标志,是发育的关键调节基因。
Albert等将foxp3基因转染于CD4+CD25-T细胞中,可使其转变成抗原特异性的CD4+CD25+ Treg,并证实这种特异CD4+CD25+ Treg在造血干细胞移植中发挥重要的作用。( Eur J Immunol, 2005 )

有关FoxP3与造血干细胞移植GVHD的关系:
Miura等研究发现,接受自体或异基因骨髓移植后发生GVHD患者的外周血单个核细胞Foxp3 mRNA表达明显降低,认为可用Foxp3来评价CD4+CD25+ Treg的活化状态与抑制功能。(Blood,2004)
Zorn等在57名接受造血干细胞移植的患者中亦发现,发生cGVHD的患者其外周血Foxp3+CD4+CD25+ Treg的数量比未发生cGVHD和健康人组的明显减少。(Blood, 2005)
但Meignin等在31名接受造血干细胞移植后(中位数大于31个月)发现,造血干细胞移植组与健康人组相比,CD25high细胞及Foxp3 mRNA表达均无差异;发生GVHD组与未发生GVHD组相比,表达Foxp3的CD4+CD25highT细胞的数量无差异。(Exp Hematol. 2005)

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CD4+CD25+ 调节性T细胞( regulatory T cells ,简称Treg)是抑制性T细胞的一种亚群,最早由Sakagguchi等在自身免疫性疾病的小鼠中发现,随后在人体也发现此类细胞。CD4+CD25+ Treg在小鼠和健康人体中约占外周CD4+T细胞的5%—10%,占人体外周血单个核细胞的1%—2%;主要分布于小鼠的脾脏和人体的胸腺、外周血、淋巴器官(扁桃体)及脐静脉血。

CD4+CD25+ Treg按其来源与特征可分为天然CD4+CD25+ Treg和适应CD4+CD25+ Treg。天然CD4+CD25+ Treg来源于胸腺,通过TCR与MHC-Ⅱ类分子和自身抗原的高亲和力结合,经历了阳性选择和阴性选择;或在胸腺髓质中与树突状细胞结合,经历“修正阴性选择”(altered negative selection)*。适应CD4+CD25+ Treg由外周成熟CD4+ T细胞经特定的抗原和/或协同刺激分子作用下转变而成。

* Shevach EM. CD4+CD25+ SUPPRESSOR T CELLS:MORE QUESTIONS THAN ANSWERS. Nat Rev Immunol,2002,2:389-400

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另外有一个问题。现在大家很关注的调节性T细胞是CD4+CD25+Treg.

而据我看文献介绍。最早人们提出的调节性T细胞或者抑止性T细胞是CD8+的。 在上个世纪70年代的时候。 那时候发现在CD8+细胞群内有一群有抑止功能的细胞。

但是后来研究就中断了。 再后来到1995年,日本人发现了CD5+CD25+Treg. 现在注意力全集中到这个细胞上了。

关于CD8+Ts。 这里有关注的战友么?

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"关于CD8+Ts。 这里有关注的战友么?" 回答caiyong111:

谈谈鄙人的一点感想:
关于调节性T细胞的定义,好像有广义和狭义之分————狭义的就是指从胸腺发育而来的CD4+CD25foxp3+T 的三阳性细胞,广义的除此之外还包括凡是有Foxp3高表达的就可以获得一定的抑制免疫的作用,可以从CD4+T转化而来主要是通过细胞因子如IL-10来发挥作用的细胞。CD8+T中也有foxp3+表达的一群,也有一定抑制免疫的能力,具体来源还不清楚,有可能是从CD8+Ts在未成熟DC等作用下转化而来的。

也许以上的理解夸大了foxp3+对抑制免疫的能力的作用,但是到目前为止,鄙人还没有看到把foxp3+基因沉默掉,会使调节性T细胞的抑制免疫的能力丧失的文章。还请高手指教!!!

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