FoxP3基因
兄弟的课题正涉及到FoxP3基因,有不少感想,也有不少困惑,希望和兄弟们交流。CD4+CD25-T在外周抗原的刺激下变成 CD4+CD25+T需要 FoxP3其作用吗?或者反过来说,此基因表达的结果是这种转变马?
转自丁香园
CD4+CD25-T在外周抗原的刺激活化后就会表达CD25,作为IL2的受体,和FoxP3没什么关系,也不是Treg,当然有其他的情况,在某些细胞因子,比如IFNgamma,TGF-beta等的存在下,外周的CD4+CD25-T cell可以转化成 CD4+CD25+Treg,伴随着Foxp3的上调。
呵呵, 发表一点自己的看法,如果不对, 还请各位指点.
T细胞活化后表达CD25(IL-2受体), 是其活化形式之一. 但体内在稳态下也存在CD4+CD25+细胞, 这就是目前比较hot 的Treg.
研究T调节,首先要先排除活化T细胞的影响, 比如使用4色Flow.
至于Foxp3表达, 其实只是后者的基因array综合分析结果. 到底和Treg的双向调节功能是否就一定存在线性关系, 我认为不能过早下结论. 以Foxp3作为窗口研究T调节细胞功能,是否一定就能得到一个令人信服的结果?
呵呵, 提点自己的想法, 还望各位兄台指正.
1.实验前标记CD25单抗, 作为后续分析中Treg的一个指标;
2.实验后再次标记CD25单抗, 注意要用激发波长不同的颜色(克隆号相同, 并且flow的compensation 相同, 以期在Flow中能明显区别), 排除实验中活化的T细胞;
3.这样, 在实验中才能比较明确得发现原本存在的Treg的变化趋势. 如果想sorting 该群细胞进行Foxp3的real-time PCR分析, 也比较可靠.
4.另外, BD Pharmagin最近新出了Foxp3 的单抗, 刚用过, 效果还可以, flow上比较好调节, 不需要太强的Compensation , 有兴趣可以试一下.
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