发新话题
打印

【求助】CIK细胞!

【求助】CIK细胞!

  老板下令让我开始做CIK的课题了,可是以前课题组从来没有人养过,有几个问题想问问养过的高手:
1)CIK是悬浮生长的细胞还是贴壁的啊,能不能上传点图片看看,实在是以前没养过,一点底都没有
2)IL-1a是不是只有进口的啊?进口的到货都要一个月,实在是太晚了,有没有高手知道有现货的地方?

我在养CIK细胞,它来源于外周血的单个核细胞,是悬浮生长的淋巴细胞。我用细胞因子IL-2、CD3MCAb、PHA、GM-CSF、IFN-Y未用IL-1a。细胞生长的很好。

我们实验室的CIK都已经做人体回输很久了,CIK是悬浮细胞,但是其他细胞可能会影响他的生长,所以我们是将单采外周血单个核细胞,在IL-2,okt3,IFN-alpha的细胞因子下诱导,这样培养十三、四天回溶缩回输人体!我们不用IFN-Y,PHA、GM-CSF,IL-1a。细胞长得很好,集落很多,很大,细胞是圆的,其cd80、86等共刺激分子上调,cd8阳性比例增加!
转自丁香园
无血清培养基培养的CIK可能受到干扰因素比较少,这样的CIK回输的副作用可能比较小,因为血清对于受者毕竟是异物,也会减少其他血源性感染(比如HIV,HBV等,当然目前这种可能已经减低到很低的水平但是还是可能存在的)。因此无血清培养基培养的CIK更适合于临床,但是无血清培养的CIK其功能是否与有血清培养基的功能是否一致?有待于进一步考证!

maggie116 wrote:
请问关于human anti- CD3有好几种单克隆单体,如:HIT3,OKT3,UCHT1.应该用那种呢???



单纯丛免疫学角度来讲OKT3最好,最经典的.
http://www.nature.com/nri/journa ... 988A9FF6D354936CEBA

TOP

CIK制作流程的图片说明,很直观,相信能给你的实验带来帮助。

TOP

悬浮克隆生长的细胞群体,在培养过程中需要吹打!可用流式细胞仪鉴定,主要为CD3+CD56+的一群异质细胞群.我曾经做过无血清培养基和有血清培养基的对比,无统计学上差异,但有血清培养基细胞状态比较好.
这是我养的CIK普通光镜照片,克隆生长,细胞体积较大,胞核密度较高, 胞浆内可见分泌颗粒.

CD3-FITC/CD56-PE双色荧光标记显示CIK细胞呈黄绿色圆形.大于普通淋巴细胞(淋巴细胞成绿色荧光).荧光照片老板不同意就不发了.

照片大于300KB,发不上去呀!

TOP

发新话题