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PCR退火温度

PCR退火温度

我的引物Tm值生工给出的一个是53.25,一个是49.60;而我根据Tm=2(A+T)+4(C+G)计算,分别是54及52,请问我的PCR退火温度应该是多少比较好?

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50度,你试一试。

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一般比给出的低5——10度,具体你还得自己摸索,找出最佳温度,

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一般比给出的低5度左右就可以,引物的退火温度,有很多算法,没有算法的值都不一样,所以你可以先用一些常用的温度如50,55 等试一下,根据PCR的结果再加以调整
天涯苍苍日茫茫,风色萧萧海清凉!潮涨潮落何为是,待到功成再张扬!

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