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[热点讨论] 有奖征集真核及原核表达质粒载体

本主题由 saturn100 于 2008-3-2 21:33 置顶
1、 质粒名称:pCAMBIA-1304
2、 载体类型:植物表达双元载体(GFP融合)
3、 载体抗性:Kan(卡那霉素)HptII( 潮霉素)
4、 培养条件:37度细胞培养箱
5、 其他信息:农杆菌介导,多种植物可用的双元表达载体,GFU::GUS融合载体
6、 质粒图谱:

7、 特征序列区位:gusA,多克隆位点,35s 启动子,T-nos终止子,GFU::GUS融合序列

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1、 质粒名称:pBI121
2、 载体类型:植物表达双元载体
3、 载体抗性:Kan(卡那霉素)nptII(新霉素)
4、 培养条件:37度细胞培养箱
5、 其他信息:农杆菌介导,多种植物可用的双元表达载体
6、 质粒图谱:

7、 特征序列区位:gusA,多克隆位点,35s 启动子,T-nos终止子

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1、 质粒名称:pCAMBIA-3301
2、 载体类型:植物表达双元载体
3、 载体抗性:Kan(卡那霉素)
4、 培养条件:37度细胞培养箱
5、 其他信息:农杆菌介导,多种植物可用的双元表达载体,含有Phosphinothricin(抗固杀草除草剂)基因
6、 质粒图谱:

7、 特征序列区位:gusA,多克隆位点,35s 启动子,T-nos终止子,Phosphinothricin(R)

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1、 质粒名称:pCAMBIA-1391Z
2、 载体类型:植物表达双元载体
3、 载体抗性:Kan(卡那霉素)HptII( 潮霉素)
4、 培养条件:37度细胞培养箱
5、 其他信息:农杆菌介导,多种植物可用的双元表达载体
6、 质粒图谱:

7、 特征序列区位:多克隆位点,35s 启动子,T-nos终止子,双GUS外显子

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商用的植物表达载体实际上很少,基本上都要自己在已有载体上再加工,拟南芥一般用35s启动子
但要在玉米中应用就先要把35S启动子换成Ubiquitin,水稻中就换成Actl启动子,最后再加上自己的基因.
这里我发了几个常用的,其中pBI121和pCAMBIA-3301是我用过的,都不错.
pCAMBIA系列载体都是(CAMBIA)澳大利亚国际农业分子生物学应用中心开发的,多数研究机构都在用.有兴趣的兄弟可以查查这方面的资料.

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Gateway其实就是几个PCR反应,先PCR将基因两端加上给定序列的接头,再进行BP反应
就是把基因加到pDNOR221载体上,保存好这个载体啊,以后可以直接转到你想要的任意载体上去.当然必须是invitrigen公司设计好的了
之后进行LR反应,将基因转到你需要的载体上
这套系统可干的事情很多,包括建库都变得十分简单了,缺点是费用较高(反应试剂盒差不多4,5千,十次左右)

BP反应用的载体pDNOR221
1、 质粒名称:pDNOR221
2、 载体类型:植物表达双元载体
3、 载体抗性:Kan(卡那霉素)
4、 培养条件:37度细胞培养箱
5、 其他信息:供体载体,ccdB致死基因(未被替换的菌株致死)
6、 质粒图谱:

7、 特征序列区位:T7,M13,ATTB1,ATTB2位点,ccdB基因

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下面是几个LR反应用的Destination载体
1、 质粒名称:pK7GWIWG2(1),0
2、 载体类型:农杆菌介导植物表达RNAi双元载体
3、 载体抗性:Kan(卡那霉素植物中)SPC(壮观霉素细菌中)
4、 培养条件:37度细胞培养箱
5、 其他信息:Destination载体,双ccdB致死基因(未被替换的菌株致死),双ATTB1,ATTB2位点
6、 质粒图谱:

7、 特征序列区位:双ATTB1,ATTB2位点,双ccdB基因,双35spromotor

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1、 质粒名称:pBGWFS7
2、 载体类型:农杆菌介导植物表达promoter-GFP融合双元载体
3、 载体抗性:BAR(植物中抗Basta除草剂)SPC(细菌中壮观霉素)
4、 培养条件:37度细胞培养箱
5、 其他信息:Destination载体,ccdB致死基因(未被替换的菌株致死),ATTB1,ATTB2位点
融合了GPF的载体,可以分析promoter的表达作用
6、 质粒图谱:

7、 特征序列区位:ATTB1,ATTB2位点,ccdB基因,eGFP基因

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1、 质粒名称:pK7FWG2
2、 载体类型:农杆菌介导植物表达N端融合GFP(绿色荧光蛋白)双元载体
3、 载体抗性:Kan(植物中卡那霉素)SPC(细菌中壮观霉素)
4、 培养条件:37度细胞培养箱
5、 其他信息:Destination载体,ccdB致死基因(未被替换的菌株致死),ATTB1,ATTB2位点
融合了GPF的载体,可以进行基因表达亚细胞定位
6、 质粒图谱:

7、 特征序列区位:ATTB1,ATTB2位点,ccdB基因,eGFP基因,35s启动子

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1、 质粒名称:pB2GW7
2、 载体类型:农杆菌介导植物表达双元载体
3、 载体抗性:BAR(植物中抗Basta除草剂)SPC(细菌中壮观霉素)
4、 培养条件:37度细胞培养箱
5、 其他信息:Destination载体,ccdB致死基因(未被替换的菌株致死),ATTB1,ATTB2位点
普通表达载体,含BAR基因
6、 质粒图谱:

7、 特征序列区位:ATTB1,ATTB2位点,ccdB基因,35s启动子

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1、 质粒名称:pK7FWGF2
2、 载体类型:农杆菌介导植物表达双融合GFP双元载体
3、 载体抗性:Kan(植物中卡那霉素)SPC(细菌中壮观霉素)
4、 培养条件:37度细胞培养箱
5、 其他信息:Destination载体,ccdB致死基因(未被替换的菌株致死),ATTB1,ATTB2位点
普通表达载体,N端C端双融合GFP,可以进行基因表达亚细胞定位
6、 质粒图谱:

7、 特征序列区位:ATTB1,ATTB2位点,ccdB基因,双eGFP基因,双35s启动子

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1、 质粒名称:pK7RWG2
2、 载体类型:农杆菌介导植物表达N端融合RFP(红色荧光蛋白)双元载体
3、 载体抗性:Kan(植物中卡那霉素)SPC(细菌中壮观霉素)
4、 培养条件:37度细胞培养箱
5、 其他信息:Destination载体,ccdB致死基因(未被替换的菌株致死),ATTB1,ATTB2位点
融合了RPF的载体,可以进行基因表达亚细胞定位和蛋白互作(同CFP,YFP)
6、 质粒图谱:

7、 特征序列区位:ATTB1,ATTB2位点,ccdB基因,rfp基因,35s启动子

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1、 质粒名称:pK7YWG2
2、 载体类型:农杆菌介导植物表达N端融合YFP(黄色荧光蛋白)双元载体
3、 载体抗性:Kan(植物中卡那霉素)SPC(细菌中壮观霉素)
4、 培养条件:37度细胞培养箱
5、 其他信息:Destination载体,ccdB致死基因(未被替换的菌株致死),ATTB1,ATTB2位点
融合了YPF的载体,可以进行基因表达亚细胞定位和蛋白互作(同RFP,CFP)
6、 质粒图谱:

7、 特征序列区位:ATTB1,ATTB2位点,ccdB基因,Yfp基因,35s启动子

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1、 质粒名称:pK7RWG2
2、 载体类型:农杆菌介导植物表达N端融合CFP(青色荧光蛋白)双元载体
3、 载体抗性:Kan(植物中卡那霉素)SPC(细菌中壮观霉素)
4、 培养条件:37度细胞培养箱
5、 其他信息:Destination载体,ccdB致死基因(未被替换的菌株致死),ATTB1,ATTB2位点
融合了CPF的载体,可以进行基因表达亚细胞定位和蛋白互作(同RFP,YFP)
6、 质粒图谱:

7、 特征序列区位:ATTB1,ATTB2位点,ccdB基因,cfp基因,35s启动子

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发贴的过程也是我总结的过程,感觉自己进步了不少啊!

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