Gateway其实就是几个PCR反应,先PCR将基因两端加上给定序列的接头,再进行BP反应
就是把基因加到pDNOR221载体上,保存好这个载体啊,以后可以直接转到你想要的任意载体上去.当然必须是invitrigen公司设计好的了
之后进行LR反应,将基因转到你需要的载体上
这套系统可干的事情很多,包括建库都变得十分简单了,缺点是费用较高(反应试剂盒差不多4,5千,十次左右)
BP反应用的载体pDNOR221
1、 质粒名称:pDNOR221
2、 载体类型:植物表达双元载体
3、 载体抗性:Kan(卡那霉素)
4、 培养条件:37度细胞培养箱
5、 其他信息:供体载体,ccdB致死基因(未被替换的菌株致死)
6、 质粒图谱:

7、 特征序列区位:T7,M13,ATTB1,ATTB2位点,ccdB基因