pekingma

为了相应论坛的号召，为了提高分子生物学讨论区的讨论水平，加强专业版块的运作，更好地解决会员的各种疑难，我们准备举办几期专家坐堂栏目，回答会员的问题。我们这次请saturn100斑竹来开个头。saturn100目前就读于东北师范大学，在分子生物学，遗传学，细胞生物学各种实验技术，生物信息学方面有一定的经验，希望这次活动能带动大家积极讨论的兴趣，从中有所收获！大家有问题可以直接回帖提出，不必另发主题贴。
专家介绍
论坛ID：saturn100
所学专业：表观遗传学
学历：硕士
所在院校：东北师范大学
专长：分子生物学，遗传学，细胞生物学各种实验技术，生物信息学
发表论文：
承诺的任期：半年以上

当然你也是分子生物学方面的专家，也欢迎你能够自告奋勇，参加到鸭绿江的专业化建设中来。我们也会给予优厚的待遇。如果认为自己不是专家，但是认识专业水平高，而且有一定上网时间的朋友、同学、老师，也可以推荐到论坛来，如果该专家在论坛任期满三个月，给予推荐人10威望，100财富的奖励。http://forum.e2002.com/read.php?tid=186718
还犹豫什么，大家快点行动起来吧！

neuromacklon

[s:94] 需要构建转基因小鼠模型，在Genbank中查到目的基因ataxin-3c的mRNA序列如下所示，但还出现了这样一句话：“NM_001024631.1 was permanently suppressed because it is a nonsense-mediated mRNA decay (NMD) candidate”，请问您这句话说明什么？我需要其cDNA，用mRNA反转录成cDNA后转入小鼠体内后，蛋白是否可以稳定表达？
LOCUS    NM_001024631    2612 bp  mRNA  linear  PRI
DEFINITION Homo sapiens ataxin 3 (ATXN3), transcript variant 3, mRNA.
ACCESSION  NM_001024631
    1 ggggcggagc tggagggggt ggttcggcgt gggggccgtt ggctccagac aaataaacat
    61 ggagtccatc ttccacgaga aacaagaagg ctcactttgt gctcaacatt gcctgaataa
   121 cttattgcaa ggagaatatt ttagccctgt ggaattatcc tcaattgcac atcagctgga
   181 tgaggaggag aggatgagaa tggcagaagg aggagttact agtgaagatt atcgcacgtt
   241 tttacagcag ccttctggaa atatggatga cagtggtttt ttctctattc agaaatgaaa
   301 gatcatttat atgcaattat aaggaacact ggtttacagt tagaaaatta ggaaaacagt
   361 ggtttaactt gaattctctc ttgacgggtc cagaattaat atcagataca tatcttgcac
   421 ttttcttggc tcaattacaa caggaaggtt attctatatt tgtcgttaag ggtgatctgc
   481 cagattgcga agctgaccaa ctcctgcaga tgattagggt ccaacagatg catcgaccaa
   541 aacttattgg agaagaatta gcacaactaa aagagcaaag agtccataaa acagacctgg
   601 aacgagtgtt agaagcaaat gatggctcag gaatgttaga cgaagatgag gaggatttgc
   661 agagggctct ggcactaagt cgccaagaaa ttgacatgga agatgaggaa gcagatctcc
   721 gcagggctat tcagctaagt atgcaaggta gttccagaaa catatctcaa gatatgacac
   781 agacatcagg tacaaatctt acttcagaag agcttcggaa gagacgagaa gcctactttg
   841 aaaaacagca gcaaaagcag caacagcagc agcagcagca gcagcagggg gacctatcag
   901 gacagagttc acatccatgt gaaaggccag ccaccagttc aggagcactt gggagtgatc
   961 taggtgatgc tatgagtgaa gaagacatgc ttcaggcagc tgtgaccatg tctttagaaa
   1021 ctgtcagaaa tgatttgaaa acagaaggaa aaaaataata cctttaaaaa ataatttaga
   1081 tattcatact ttccaacatt atcctgtgtg attacagcat agggtccact ttggtaatgt
   1141 gtcaaagaga tgaggaaata agacttttag cggtttgcaa acaaaatgat gggaaagtgg
   1201 aacaatgcgt cggttgtagg actaaataat gatcttccaa atattagcca aagaggcatt
   1261 cagcaattaa agacatttaa aatagttttc taaatgtttc tttttctttt ttgagtgtgc
   1321 aatatgtaac atgtctaaag ttagggcatt tttcttggat ctttttgcag actagctaat
   1381 tagctctcgc ctcaggcttt ttccatatag tttgttttct ttttctgtct tgtaggtaag
   1441 ttggctcaca tcatgtaata gtggctttca tttcttatta accaaattaa cctttcagga
   1501 aagtatctct actttcctga tgttgataat agtaatggtt ctagaaggat gaacagttct
   1561 cccttcaact gtataccgtg tgctccagtg ttttcttgtg ttgttttctc tgatcacaac
   1621 ttttctgcta cctggttttc attattttcc cacaattctt ttgaaagatg gtaatctttt
   1681 ctgaggttta gcgttttaag ccctacgatg ggatcattat ttcatgactg gtgcgttcct
   1741 aaactctgaa atcagccttg cacaagtact tgagaataaa tgagcatttt ttaaaatgtg
   1801 tgagcatgtg ctttcccaga tgctttatga atgtcttttc acttatatca aaaccttaca
   1861 gctttgttgc aaccccttct tcctgcgcct tattttttcc tttcttctcc aattgagaaa
   1921 actaggagaa gcatagtatg caggcaagtc tccttctgtt agaagactaa acatacgtac
   1981 ccaccatgaa tgtatgatac atgaaatttg gccttcaatt ttaatagcag ttttatttta
   2041 ttttttctcc tatgactgga gctttgtgtt ctctttacag ttgagtcatg gaatgtaggt
   2101 gtctgcttca catcttttag taggtatagc ttgtcaaaga tggtgatctg gaacatgaaa
   2161 ataatttact aatgaaaata tgtttaaatt tatactgtga tttgacactt gcatcatgtt
   2221 tagatagctt aagaacaatg gaagtcacag tacttagtgg atctataaat aagaaagtcc
   2281 atagttttga taaatattct ctttaattga gatgtacaga gagtttcttg ctgggtcaat
   2341 aggatagtat cattttggtg aaaaccatgt ctctgaaatt gatgttttag tttcagtgtt
   2401 ccctatccct cattctccat ctccttttga agctcttttg aatgttgaat tgttcataag
   2461 ctaaaatcca agaaatttca gctgacaact tcgaaaatta taatatggta tattgccctc
   2521 ctggtgtgtg gctgcacaca ttttatcagg gaaagttttt tgatctagga tttattgcta
   2581 actaactgaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aa

neuromacklon

课题相关。但不知道怎样理解？恳请专家指导！

saturn100

permanently suppressed because it is a nonsense-mediated mRNA decay (NMD) candidate
从字面理解是说因为无义介导的mRNA降解所以被永久的抑制，
我不太清楚这个基因有什么作用，不过从这句话来看
although you insert into a vector to form a expression plasmid, no matter it express, i think the gene maybe have no function

这完全是不懂装懂，瞎说的，hope for your comments

无义介导的mRNA降解(nonsense-mediated mRNA decay,NMD)能够选择性降解含有翻译提前终止密码子(premature translation termination condon,PTC)的mRNA,从而防止对机体有害的截短蛋白(truncated proteins)的产生,它是真核生物中广泛存在的一种高度保守的有效的监督机制.NMD与肿瘤发生发展过程中的基因突变有密切关系

easyscu2008

最近在做扫描电镜 材料是聚乳酸膜 想看看在上面种了细胞后 细胞的形貌
细胞是ros17/2.8
用的方法是：2.5%戊二醛固定2小时，pbs洗两次，蒸馏水洗两次后，用 梯度酒精脱水，临界点干燥，喷金，照电镜
没有用乙酸异戊酯是因为聚乳酸在里面要溶解
可是出现了这样的问题：细胞的形貌看起来很简单，看不到触角之类的东西，最严重的就是好像聚乳酸材料有溶解，细胞好像是包埋在膜里面的，难道梯度脱水过程中，聚乳酸膜溶解了？

希望专家能够提供意见和建议 或者是解决方法？
非常感谢

saturn100

[s:103] 呵呵，我看兄弟这个帖子了，不过我没有做过扫描电镜，所以不太懂这个问题，不好意思，无能为力了[s:123]

easyscu2008

[s:94] 哦还是非常感谢哈