漂浮导管

最近做Western-Blotting，从实验室的老鸟身上诈出一张匀浆液的秘方，据该名老鸟说，屡试不爽，呵呵，我看了看其实好像什么神奇的东西，哎，我是照着这个做的，结果还行，大家看看，参考参考。

配置100ml匀浆液，需要如下
MOPS      1.05g
Sucrose    10.95g
KCl        0.75g
MgCl2      0.5ml
DTT        1.0ml
EDTA      1.0ml
EGTA      1.0ml
PNPP      0.5ml
Na3VO4    1.0ml


如果是磷酸化的抗体，则除上述液体外还需要加入
NaF        0.21g
NaPP      0.89g
B-甘油   0.43g
  

加入上述试剂后，滴定PH至7.4，再定容至100ml

然后加入以下试剂，注意现用现配，不要放置很长时间
aprotintin    0.1ml
Leupept     0.1ml
pepstatin    0.1ml
PMSF       0.5ml
benzamidine  1ml


OK了，不知道其他战友都用的什么，偶感觉这个比从国内碧云天等公司购买的裂解液要好用的多，做出的图还比较完美哩，权当参考。

[ 本帖最后由 ted_sun 于 2008-7-28 14:34 编辑 ]