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hqu98142035

丑小鸭

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tT
发表于 2007-11-6 22:15 | 只看该作者

PPIC9K及GS115的问题

将目的基因插入PPIC9K中,转入毕赤酵母GS115后得到的阳性克隆,目的蛋白表达量太少,
可否将线性化的PPIC9K(含目的基因)再转化到该阳性克隆中去,以增强表达,
如果可以那如何筛选阳性克隆呢?可否通过加大遗传霉毒的含量,或者直接通过定性平板,(说的可能不清楚),......
麻烦知道的人回复一下

顺确定一下,GS115本身是不能在含有遗传霉素的平板上生长的,对吧?
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世事难料人间的悲喜,今生无缘来生再聚
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saturn100

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发表于 2007-11-6 22:38 | 只看该作者
[s:94] [s:103]
PPIC9K这个载体没有用过，不过我想目的蛋白表达量太少，是不是因为诱导的条件不太好呢，可以再摸索一下，
然后这个载体有Kana和Amp两种抗性所以我想筛选阳性克隆的问题应该很简单吧，无论是Kana还是Amp的平板应该都可以吧
天涯苍苍日茫茫，风色萧萧海清凉！潮涨潮落何为是，待到功成再张扬！
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发表于 2007-12-15 01:06 | 只看该作者
哦,:)
顺便问一下:
有没有可以在铜绿假单胞菌中表达的载体啊,它们的名字是什么,
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发表于 2007-12-15 11:11 | 只看该作者
[s:94] [s:103] 兄弟不好意思，这个我就不太清楚了
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