苯酚-硫酸法测糖含量标准曲线的制作为什么OD值这么没规律
苯酚-硫酸法测糖含量标准曲线的制作为什么OD值这么没规律
要使用苯酚硫酸法测定样品中总糖得含量,最近刚试着制作标准曲线,以前没有做过类似试验。发现如下问题:
表64-1 苯酚-硫酸法标准曲线制作参考表
葡萄糖(40mg/l)mL 蒸馏水(mL)6%苯酚(mL)浓硫酸(mL) OD490nm
1.6 0.4 1 5 0.093
1.4 0.6 1 5 0.064
1.2 0.8 1 5 0.065
1.0 1.0 1 5 0.047
0.8 1.2 1 5 0.049
0.6 1.4 1 5 0.136
0.4 1.6 1 5 0.072
0.2 1.8 1 5 0.008
0.0 2.0 1 5 0
静置10min,摇匀,室温放置20min以后于490nm波长下检测光密度,以2.0mL水按同样显色操作为空白,测定后取得所得样品的OD平均值.
使用的葡萄糖标准溶液是40ug/ml.。可是得到得OD值确这么没有规律,我并没有设置三个平行,但是总体得OD值走向也不致于这样啊,真是奇怪!请大家帮忙啊!
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