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[波谱分析] 【讨论】做核磁是到底加多少样品合适?

本主题由 System 于 2008-5-20 05:00 解除限时高亮

【讨论】做核磁是到底加多少样品合适?

平时我报原料药做结构确证时经常碰到要做氢谱、碳谱、DEPT,H—H,C-H等谱图,各种样品所加的量相同吗,不同各种谱图大概加多少?

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大家配样品时要注意以下几点:1、样品量的问题:一般对于H NMR来说需要的量比较小,大概几个毫摩尔就可以了,对于二维谱和碳谱浓度就要比较大,最好有几十个毫摩尔。2、溶剂量的问题:一般样品的溶剂量应该在0.5ML,大概在核磁管中的长度为4CM左右。溶剂量太小了会影响匀场,进而影响实验的速度,和谱图的效果;溶剂量太大了嘛,那 就太浪费了。3、溶剂选择的问题:选择的原则是:样品易溶解,溶剂峰和样品峰没有重叠,粘度低,并且价格便宜。大家在选择的时候主要是样品的溶解性问题。4、核磁管的问题:首先尽量选用优质核磁管,还有就是最好不要在核磁管上乱贴标签, 这会导致核磁管轴向的不均衡,在样品旋转的时候影响分辨率,还有可能打碎核磁管造成重大损失。

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另外,我觉得做核磁时样品溶液的浓度大小也是非常关键的,
1,你可以考虑用加内标的方法,加入一个对你样品没有干扰的样品(样品的H位移最好与加入物不同),然后通过计算H计算样品浓度。

2,太稀的话好像是有毛刺的,有些出的峰看不到

假如是问多少浓度的样品做出的核磁图谱最好,那么就是分子量大的加多一些,因为信号出来的时候不是根据质量的,而是根据摩尔浓度的。一般来说,分子量在200左右的,10~20mg做氢谱就比较好了。浓度太大做氢谱匀场不会太好,那么有些精细的耦合裂分就表现不出来,而且由于增益太小,图谱质量很差的。

要是做碳谱,13C对磁场的均匀度要求不高,在样品量足够的情况下,尽量增加吧,因为样品量越大,需要时间越短。另外信噪比也好。一些信号弱的季碳、连氮的由于14N而加宽的13C信号及连氟的碳由于裂分而使信号弱的碳出峰会很好的。

而你如果是要想定量,那么就需要加入标准物品了,找一个在样品用的试剂中溶解行好的标准品,保证两个不反应,还需要样品和标准品至少各有一各峰完全分开,不叠加在一起,就可以用标准品的峰面积和样品峰面积比较,据此来求出样品的浓度。需要注意的是驰豫时间要选择足够长,使样品和标准品都充分驰豫。

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学学习,好资料!!!

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引用:
原帖由 chenwei6669 于 2007-12-31 17:35 发表
另外,我觉得做核磁时样品溶液的浓度大小也是非常关键的,
1,你可以考虑用加内标的方法,加入一个对你样品没有干扰的样品(样品的H位移最好与加入物不同),然后通过计算H计算样品浓度。

2,太稀的话好像是有毛刺的, ...
H谱要10-20mg,有没有搞错,一般样品5mg已经足够了,C谱的话如果样品充足50mg也可以啦
本帖最近评分记录
  • gcliao 鸭币 +20 请继续参加学术讨论 2008-4-18 11:24

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引用:
原帖由 shen3511 于 2008-4-17 22:03 发表

H谱要10-20mg,有没有搞错,一般样品5mg已经足够了,C谱的话如果样品充足50mg也可以啦
赞成兄弟的观点

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我们做时是加10-20mg,所有的谱(1DNMR, 2DNMR)都一起做了。

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